.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 374.32 GNF-2 es un inhibidor competitivo no ATP altamente selectivo de Bcr-Abl, no muestra actividad para Flt3-ITD, Tel-PDGFR, TPR-MET y Tel -Células tumorales transformadas con JAK1. \ N Actividad biológica GNF-2 provoca una inhibición del crecimiento dependiente de la dosis de las líneas celulares positivas para Bcr-abl con valores de CI50 de 273 nM (K562) y 268 nM (SUP-B15). GNF-2 inhibe el crecimiento de células Ba / F3.p210E255V y Ba / F3.p185Y253H con valores de CI50 de 268 nM y 194 nM respectivamente. GNF-2 (1 μM) induce la apoptosis de las células Ba / F3.p210 así como de las células Ba / F3.p210E255V. GNF-2 inhibe la fosforilación de tirosina celular de Bcr-abl de una manera dependiente de la dosis con IC50 de 267 nM. GNF-2 (1 μM) induce una disminución significativa en los niveles de fosfo-Stat5 en las células Ba / F3.p210. GNF-2 se une al bolsillo de encuadernación mirístico de Bcr-abl. GNF-2 inhibe la actividad quinasa de c-Abl no miristoilado de manera más potente que la de c-Abl miristoilado al unirse al bolsillo de unión a miristato en el lóbulo C del dominio quinasa. GNF-2 (10 µM) requiere BCR y / o los dominios c-Abl SH3 y / o SH2 para inhibir la proliferación celular dependiente de BCR-Abl. GNF-2, pero no un análogo de GNF-2 metilado, se une a c-Abl en extractos celulares derivados de fibroblastos 3T3. GNF-2 (10 µM), de una manera dependiente de la dosis, inhibe claramente la fosforilación de tirosina de CrkII. GNF-2 inhibe la fosforilación de CrkII en células que expresan c-AblG2A con IC50 de 0.051 μM. GNF-2 se une en una conformación extendida en el bolsillo de miristato con el grupo CF3 enterrado a la misma profundidad que los dos últimos carbonos del ligando miristato. GNF-2 (10 µM) combinado con imatinib (1 µM) reduce el número de clones resistentes a imatinib 1 µM en al menos un 90%. GNF-2 inhibe la autofosforilación y proliferación de células BafF3 que expresan mutantes p210Bcr-Abl y p210Bcr-Abl. GNF-2 (8 nM) en combinación con GNF-5 (20 nM) da como resultado efectos aditivos con respecto a la inhibición de la actividad quinasa Abl64-515. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [2]
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Binding assay
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Recombinant proteins (100 nM for each construct) or immunoprecipitated proteins are diluted in kinase buffer (20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 0.1% CHAPS, 30 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT, and 1% glycerol). Aliquots of the diluted proteins are preincubated with either DMSO or compounds for 30 min at room temperature and then added to K-LISA PTK EAY reaction plates. The kinase reaction is initiated by adding 0.1 mM ATP and is allowed to proceed for 30 min at room temperature. The phosphorylation of GST-Abltide is monitored by SDS-PAGE and phosphorimaging analysis or autoradiography.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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Ba/F3.p210, Ba/F3.p210E255V and Ba/F3.p185Y253H cells
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Concentrations
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~10 μM
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Incubation Time
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48 hours
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Method
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Cells (0.3-0.6 × 106 per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO2 for 48 hours, the effect of GNF-2 on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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374.32
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Formula
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C18H13F3N4O2
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CAS No.
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778270-11-4
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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74 mg/mL
(197.69 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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Benzamide, 3-[6-[[4-(trifluoromethoxy)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]-
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : Angiogénesis > Inhibidor de Bcr-Abl
