Foretinib (GSK1363089) 849217-64-7

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 632.65 Foretinib (GSK1363089) es un inhibidor competitivo de ATP de HGFR y VEGFR, principalmente para Met y KDR con IC50 de 0.4 nM y 0.9 nM. Menos potente contra Ron, Flt-1/3/4, Kit, PDGFRα / β y Tie-2, y poca actividad contra FGFR1 y EGFR. Fase 2. \ n Actividad biológica XL880 inhibe las tirosina quinasas de la familia de receptores de HGF con valores de CI50 de 0,4 nM para Met y 3 nM para Ron. XL880 también inhibe KDR, Flt-1 y Flt-4 con valores de IC50 de 0,9 nM, 6,8 nM y 2,8 nM, respectivamente. XL880 inhibe el crecimiento de colonias de células B16F10, A549 y HT29 con IC50 de 40 nM, 29 nM y 165 nM, respectivamente. Un estudio reciente indica que XL880 afecta el crecimiento celular de manera diferente en las líneas celulares de cáncer gástrico MKN-45 y KATO-III. XL880 inhibe la fosforilación de MET y moléculas de señalización aguas abajo en las células MKN-45, mientras que se dirige a GFGR2 en las células KATO-III. Una sola dosis de 100 mg / kg por sonda oral de XL880 da como resultado una inhibición sustancial de la fosforilación del Met del tumor B16F10 y la fosforilación del receptor inducida por ligando (p. Ej., HGFor VEGF) de Met en el hígado y Flk-1 / KDR en el pulmón, que persistieron a través de 24 horas. El tratamiento con XL880 (30-100 mg / kg, una vez al día, sonda oral) reduce la carga tumoral. La carga tumoral de la superficie pulmonar se reduce en un 50% y un 58% después del tratamiento con 30 y 100 mg / kg de XL880, respectivamente. El tratamiento con XL880 de ratones que portan tumores sólidos B16F10 también da como resultado una inhibición del crecimiento tumoral dependiente de la dosis del 64% y 87% a 30 y 100 mg / kg, respectivamente. Para ambos estudios, la administración de XL880 se tolera bien sin una pérdida significativa de peso corporal. XL880 está desarrollado para apuntar a la señalización anormal de HGF a través de Met y, simultáneamente, apuntar a varios receptores de tirosina quinasa implicados en la angiogénesis tumoral. XL880 provocó hemorragia y necrosis tumoral en xenoinjertos humanos en un plazo de 2 a 4 horas, y se observa una necrosis tumoral máxima a las 96 horas (después de cinco dosis diarias), lo que da como resultado una regresión completa. \ n Ensayo de inhibición de la quinasa La inhibición de la quinasa se investiga utilizando uno de tres formatos de ensayo: transferencia de [33P] fosforilo, quimioluminiscencia acoplada a luciferasa o tecnología de tirosina quinasa AlphaScreen. Las CI50 se calculan mediante análisis de regresión no lineal usando XLFit.33P-ensayo de quinasa de transferencia de fosforil. Las reacciones se realizan en placas de microtitulación de alta unión, blancas, de fondo transparente y de 384 pocillos (Greiner, Monroe, NC). Las placas se recubren con 2 μg / pocillo de proteína o sustrato peptídico en un volumen de 50 μL de tampón de recubrimiento que contiene 40 μg / ml de sustrato (poli (Glu, Tyr) 4: 1, Na2CO3 22,5 mM, NaHCO3 27,5 mM, NaCl 50 mM y 3 mM NaN 3. Las placas recubiertas se lavan una vez con 50 μL de tampón de ensayo después de la incubación durante la noche a temperatura ambiente (TA). Los compuestos de prueba y las enzimas se combinan con 33P-γ-ATP (3,3 μCi / nmol) en un volumen total de 20 μL. La mezcla de reacción se incuba a TA durante 2 horas y se termina por aspiración. Las placas de microvaloración se lavan posteriormente 6 veces con tampón Tween-PBS (PBST) al 0,05%. Se añade líquido de centelleo (50 μL / pocillo) y se incorpora 33P. medido por espectrometría de centelleo líquido usando un contador de centelleo MicroBeta. Ensayo de quimioluminiscencia acoplado a luciferasa Las reacciones se llevan a cabo en placas de microtitulación de unión media (Greiner) blancas de 384 pocillos. En un primer paso, la enzima y el compuesto se combinan y se incuban durante 60 minutos; las reacciones se iniciado por la adición de ATP y d sustrato peptídico (poli (Glu, Tyr) 4: 1) en un volumen final de 20 μL, y se incubó a temperatura ambiente durante 2-4 horas. Después de la reacción de la quinasa, se agrega una alícuota de 20 μL de Quinasa Glo (Promega, Madison, WI) y se mide la señal de luminiscencia usando un lector de placas Victor. El consumo total de ATP está limitado al 50%. Ensayo de tirosina quinasa AlphaScreenTM Se utilizan perlas de donante recubiertas con estreptavidina y perlas aceptoras recubiertas con anticuerpo anti-fosfotirosina PY100. Se usa poli (Glu, Tyr) 4: 1 biotinilado como sustrato. La fosforilación del sustrato se mide mediante la adición de perlas donantes / aceptoras mediante luminiscencia después de la formación del complejo de perlas donantes-aceptoras. \ n La quinasa y los compuestos de prueba se combinan y preincuban durante 60 minutos, seguido de la adición de ATP y poli (Glu, Tyr) biotinilado en un volumen total de 20 μL en placas de microtitulación de unión media, blancas de 384 pocillos (Greiner). Las mezclas de reacción se incuban durante 1 hora a temperatura ambiente. Las reacciones se apagan mediante la adición de 10 μl de suspensión de perlas AlphaScreen de 15-30 μg / ml que contiene 75 mM de Hepes, pH 7,4, 300 mM de NaCl, 120 mM de EDTA, 0,3% de BSA y 0,03% de Tween-20. Después de 2-16 horas de incubación a temperatura ambiente, las placas se leen usando un lector AlphaQuest. \ n Método \ n Se mezclan células B16F10, A549 y HT29 (1,2 x 103 por pocillo) con agar blando y se siembran en una placa de 96 pocillos que contiene FBS al 10% y EXEL-2880 sobre una capa de agar base. Para condiciones normóxicas, las placas se incuban (37 ° C) durante 12 a 14 días en 21% de oxígeno, 5% de CO2 y 74% de nitrógeno, mientras que la incubación (37 ° C) en condiciones de hipoxia se realiza en una cámara de hipoxia en 1 % de oxígeno, 5% de CO2 y 94% de nitrógeno. El número de colonias se evalúa en cada condición tras la adición de azul Alamar al 50% y la detección de fluorescencia.
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Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de c-Met