.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 665.66 PF-00562271 es la sal de bencenosulfonato de PF-562271, que es un inhibidor reversible potente, competitivo con ATP de FAK con IC50 de 1.5 nM, ~ 10- veces menos potente para Pyk2 que FAK y selectividad> 100 veces contra otras proteína quinasas, excepto para algunas CDK. Fase 1. \ n Actividad biológica PF-562271 muestra los efectos inhibidores selectivos sobre la actividad tirosina quinasa FAK y Pyk2 con IC50 de 1,5 nM y 14 nM, respectivamente. Y en los ensayos basados en células, se muestra que la CI50 de PF-562271 es 5 nM para FAK, que es más selectiva en comparación con otras dianas de quinasas. En cultivos bidimensionales (2D), PF-562271 da como resultado una inhibición de la proliferación celular dependiente de la dosis en células deficientes en FAK WT, FAK - / - y FAK quinasa (KD) con IC50 de 3,3 μM, 2,08 μM y 2,01 μM, respectivamente . En varios modelos de xenoinjerto sc humano, PF-562271 exhibe inhibición del crecimiento tumoral dependiente de la dosis y produce una inhibición tumoral máxima para PC-3M, BT474, BxPc3 y LoVo que varía de 78% a 94% de inhibición a dosis de 25 a 50 mg / kg dos veces al día, sin pérdida de peso, morbilidad ni muerte. PF-562271 (25 mg / kg por vía oral) conduce a una disminución significativa en la progresión del tumor en los modelos de xenoinjerto PC3M-luc-C6 de metástasis tanto subcutánea como ósea. En un modelo de xenoinjerto de carcinoma hepatocelular Huh7.5, la terapia de combinación de sunitinib y PF-562271 se dirige a la angiogénesis y la agresividad del tumor, y produce un efecto antitumoral más significativo que el agente único al bloquear el crecimiento del tumor y afectar la capacidad del tumor para recuperarse tras la retirada. de la terapia. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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Recombinant kinase assay and enzyme kinetics
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Briefly, purified-activated FAK kinase domain (amino acid 410–689) is reacted with 50 μM ATP and 10 μg per well of a random peptide polymer of Glu and Tyr, p(Glu/Tyr), in kinase buffer [50 mM HEPES (pH 7.5), 125 mM NaCl, and 48 mM MgCl2] for 15 minutes. Phosphorylation of p(Glu/Tyr) is challenged with serially diluted PF-562271 at 1/2-Log concentrations starting at a top concentration of 1 μM. Each concentration is tested in triplicate. Phosphorylation of p(Glu/Tyr) is detected with a general antiphospho-tyrosine (PY20) antibody followed by horseradish peroxidase (HRP)-conjugated goat anti-mouse IgG antibody. HRP substrate is added, and absorbance readings at 450 nm are obtained after addition of stop solution (2 M H2SO4). IC50 values are determined using the Hill-Slope Model. Broad kinase selectivity profiling is performed in house and by using the KinaseProfiler Selectivity Screening Service available through UpState Biotechnology.
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Ensayo celular: [2]
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Cell lines
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Squamous cell carcinoma (SCC)
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Concentrations
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0 to 1 μM
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Incubation Time
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72 hours
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Method
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Cells are plated for 48 hours before addition of PF-562271. After 3 days cells are fixed by addition of ice cold 25% trichloroacetic acid (TCA) solution prior to staining with Sulforhodamine B (SRB) dye solution. Plates are washed with 1% glacial acetic acid, air-dried and resuspended in 10 mM Tris buffer, pH 10.5 before reading absorbance at 540 nm. Curve fitting and generation of IC50 values is carried out using GraphPad Prism 4 software from six replicates.
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Estudio con animales: [1]
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Animal Models
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PC-3M, BT474, BxPc3, LoVo, U87MG, H125 and H460 cells are injected s.c. into the right flank of athymic female mice .
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Formulation
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PF-562271 is dissolved in 5% Gelucire.
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Dosages
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≤100 mg/kg
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Administration
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Administered via p.o.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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665.66
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Formula
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C21H20F3N7O3S.C6H6O3S
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CAS No.
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939791-38-5
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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PF-562271 Besylate
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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14 mg/mL
heating
(21.03 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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N-methyl-N-(3-((2-(2-oxoindolin-5-ylamino)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-ylamino)methyl)pyridin-2-yl)methanesulfonamide benzenesulfonate
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : Angiogénesis > Inhibidor de FAK
