TSU-68 (SU6668, Orantinib) 252916-29-3

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 310.35 TSU-68 (SU6668, Orantinib) tiene la mayor potencia contra la autofosforilación de PDGFR con Ki de 8 nM, pero también inhibe fuertemente la transfosforilación de Flk-1 y FGFR1, poco actividad contra IGF-1R, Met, Src, Lck, Zap70, Abl y CDK2; no inhibe EGFR. Fase 3. \ n Actividad biológica TSU-68 es un inhibidor competitivo, con respecto al ATP, de la trans-fosforilación de Flk-1 / KDR, trans-fosforilación de FGFR1 y autofosforilación de PDGFRβ quinasas. TSU-68 (0.03-10 μM) inhibe la fosforilación de tirosina de KDR en HUVEC estimuladas por VEGF. TSU-68 también inhibe la fosforilación de tirosina de PDGFRβ estimulada por PDGF en células NIH-3T3 que sobreexpresan PDGFRβ a una concentración mínima de 0,03-0,1 µM. TSU-68 inhibe la fosforilación inducida por FGF ácido del sustrato 2 de FGFR1 a 10 μM y más. Sin embargo, TSU-68 (hasta 100 μM) no tiene ningún efecto sobre la fosforilación de tirosina EGFR estimulada por EGF en células NIH-3T3 que sobreexpresan EGFR. TSU-68 inhibe la mitogénesis de HUVEC impulsada por VEGF y FGF con una CI50 media de 0,34 μM y 9,6 μM, respectivamente. En células MO7E de leucemia mieloide humana, TSU-68 inhibe la autofosforilación de tirosina del receptor del factor de células madre (SCF), c-kit, con IC50 de 0,1-1 μM, así como la fosforilación de ERK1 / 2, un evento de señalización aguas abajo de c- activación del kit. TSU-68 también inhibe la proliferación inducida por SCF de células MO7E con IC50 de 0,29 μM e induce apoptosis. TSU-68 (75-200 mg / kg) induce la inhibición del crecimiento tumoral contra una amplia gama de tipos de tumores en modelos de xenoinjerto en ratones atímicos, incluidas las células A375, Colo205, H460, Calu-6, C6, SF763T y SKOV3TP5. TSU-68 (75 mg / kg) también suprime la angiogénesis tumoral de xenoinjertos de glioma C6. En un modelo de tumor de carcinoma de colon humano HT29, TSU-68 (200 mg / kg) disminuye la permeabilidad media de los vasos y el volumen de plasma fraccional medio en el borde y el núcleo del tumor. TSU-68 promueve el desarrollo anormal del estroma en la periferia de los carcinomas. En un modelo de tumor hepático VX2 de conejo, TSU-68 (200 mg / kg) aumenta el efecto de la infusión quimioterapéutica. \ n Reacciones de transfosforilación Los ensayos de tirosina quinasa para cuantificar la actividad de transfosforilación de Flk-1 y FGFR1 se realizan en placas de microtitulación de 96 pocillos recubiertas previamente (20 μg / pocillo en PBS; incubadas durante la noche a 4 ° C) con el sustrato peptídico poli-Glu, Tyr (4: 1). Los sitios de unión a proteínas en exceso se bloquean con 1-5% (p / v) de BSA en PBS. A continuación, se añaden proteínas de fusión GST-FGFR1 (dominio quinasa) o GST-Flk-1 (dominio citoplásmico) purificadas a los pocillos de microtitulación en tampón de dilución de quinasa de concentración 2x ​​que consta de HEPES 100 mM, NaCl 50 mM, NaVO4 40 μM y 0,02 % (p / v) BSA. La concentración final de enzima para GST-Flk-1 y GST-FGFR1 es 50 ng / mL. SU6668 se disuelve en DMSO a 100 veces la concentración final requerida y se diluye 1:25 en H2O. A continuación, se añaden veinticinco μl de SU6668 diluido a cada pocillo de reacción. La reacción de la quinasa se inicia mediante la adición de diferentes concentraciones de ATP en una solución de MnCl2 de modo que las concentraciones finales de ATP abarquen la Km de la enzima y la concentración final de MnCl2 sea 10 mM. Las placas se incuban durante 5-15 min a temperatura ambiente antes de detener la reacción con la adición de EDTA. A continuación, las placas se lavan tres veces con TBST. Se añaden antisueros policlonales antifosfotirosina de conejo a los pocillos en una dilución de 1: 10000 en TBST que contiene 0,5% (p / v) de BSA, 0,025% (p / v) de leche en polvo descremada y 100 μM de NaVO4 y se incuban durante 1 hora a 37 ° C. C. A continuación, las placas se lavan tres veces con TBST, seguido de la adición de antisuero de cabra anti-conejo conjugado con HRP. Las placas se incuban durante 1 hora a 37 ° C y luego se lavan tres veces con TBST. La cantidad de fosfotirosina en cada pocillo se cuantifica después de la adición de 2,2 \ n Método \ n Las células se siembran (3 x 105 células / pocillo de 35 mm) en DMEM que contiene 10% (v / v) de FBS y crecen hasta la confluencia y luego se inactivó en DMEM que contenía suero al 0,1% durante 2 horas antes del tratamiento con el fármaco. Las HUVEC (sembradas a 2 x 106 células / placa de 10 cm) se cultivan hasta la confluencia en medio de crecimiento de células endoteliales y luego se inactivan en medio basal de células endoteliales que contiene FBS al 0,5% durante 24 horas antes del tratamiento con el fármaco. Todas las líneas celulares se incuban con SU6668 durante 1 hora antes de la estimulación del ligando (100 ng / ml) durante 10 min.
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Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de FLT3