Pazopanib HCl (GW786034 HCl) 635702-64-6

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 473,98 Pazopanib (GW786034) es un nuevo inhibidor multiobjetivo de VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, PDGFR, FGFR, c-Kit y c-Fms con IC50 de 10 nM , 30 nM, 47 nM, 84 nM, 74 nM, 140 nM y 146 nM, respectivamente. \ N Actividad biológica Pazopanib inhibe de forma potente la fosforilación de VEGFR2 inducida por VEGF en células HUVEC con IC50 de 8 nM. Pazopanib muestra inhibición del crecimiento dependiente de la dosis en todas las líneas celulares de sarcoma sinovial, incluidas las células SYO-1 y HS-SY-II. La proliferación de células SYO-1 y HS-SY-II se inhibe incluso con 1 µg / ml de pazopanib y se elimina por completo con 5 µg / ml. Pazopanib induce la detención de G1 y, por lo tanto, suprime el crecimiento de las células del sarcoma sinovial. La fosforilación de Akts, GSK-3β, JNK, p70 S6 quinasa y mTOR se suprime en las células SYO-1 tratadas con pazopanib en comparación con las células tratadas con vehículo. Pazopanib entre 20 mg / ml y 22,5 mg / ml muestra una reducción creciente de la viabilidad de las células del RPE. Los ratones tratados con 30 mg / kg o 100 mg / kg de pazopanib revelan una disminución significativa en la carga tumoral en comparación con los ratones tratados con vehículo o 10 mg / kg de pazopanib. El tratamiento con pazopanib se tolera bien y no hay una diferencia significativa en el peso corporal entre los ratones de cada grupo. \ n Ensayos de enzima quinasa Los ensayos de enzima VEGFR para VEGGR1, VEGFR2 y VEGFR3 se realizan en formato de fluorescencia homogénea de resolución temporal (HTRF) en placas de microtitulación de 384 pocillos utilizando una proteína de fusión de glutatión-S-transferasa (GST) purificada y expresada en baculovirus que codifica el c-terminal catalítico de las quinasas 1, 2 o 3 del receptor VEGFR humano. Las reacciones se inician mediante la adición de 10 μL de solución de quinasa VEGFR2 activada [concentración final, enzima 1 nM en HEPES 0,1 M, pH 7,5, que contiene 0,1 mg / ml de albúmina de suero bovino (BSA), ditiotreitol (DTT) 300 μM] a 10 μL de solución de sustrato [concentración final, péptido 360 nM, (biotina-aminohexil-EEEEYFELVAKKKK-NH2), ATP 75 μM, MgCl2 10 μM] y 1 μL de Pazopanib titulado en DMSO. Las placas se incuban a temperatura ambiente durante 60 min, y luego la reacción se detiene mediante la adición de 20 μL de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) 100 mM. Después de inactivar, se añaden 20 μL de reactivos HTRF (concentración final, aloficocianina unida a estreptavidina 15 nM, anticuerpo antifosfotirosina marcado con europio 1 nM diluido en BSA 0,1 mg / ml, HEPES 0,1 M, pH 7,5) y las placas se incuban durante un mínimo de 10 minutos. La fluorescencia a 665 nM se mide con un lector de placas Wallac Victor usando un retardo de tiempo de 50 µs. \ n Método \ n La fosforilación de VEGFR2 se evalúa en HUVEC estimulado con VEGF. Las HUVEC se cultivan en placas de 10 cm recubiertas con colágeno de tipo I en medio Clonetics EGM-MV a 1,0-1,5 x 106 células / placa. Después de 24 horas, las células confluentes se privan de suero durante la noche reemplazando el medio de crecimiento con medio Clonetics EBM que contiene BSA al 0,1%, 500 μg / ml de hidrocortisona. Las células se tratan con pazopanib a diversas concentraciones durante 1 hora, seguido de la adición de 10 ng / ml de VEGF o vehículo durante 10 min. Las células se solubilizan en tampón de lisis. VEGFR2 se inmunoprecipita usando anticuerpo antiflk-1 y se analiza mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) seguida de transferencia Western y detección con antiflk-1 o con anticuerpo antifosfotirosina (anti-P-tyr-biotina). El nivel de fosforilación de VEGFR2 se cuantifica por densitometría y se normaliza al nivel total de VEGFR2.
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Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de FLT3