.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 486.31 CHIR-98014 es un potente inhibidor de GSK-3α / β con IC50 de 0.65 nM / 0.58 nM, con la capacidad de distinguir GSK-3 de sus homólogos más cercanos Cdc2 y ERK2 . \ n CHIR-98014 inhibe la GSK-3β humana con Ki de 0,87 nM. CHIR-98014 es muy eficaz para prevenir la GSK-3 murina y de rata. Aunque CHIR-98014 actúa como un inhibidor competitivo simple de la unión de ATP, muestra una selectividad de 500 veces a> 1000 veces para GSK-3 frente a otras 20 proteína quinasas, incluidas Cdc2, ERK2, Tie-2 y KDR. CHIR-98014 previene Cdc2 con IC50 de 3,7 μM. Sin embargo, CHIR 98014 revela una potencia similar contra las isoformas ɑ y β altamente homólogas de GSK-3, es de destacar que discriminó fuertemente entre GSK-3 y sus homólogos más cercanos CDC2 y ERK2. La exposición de células CHO-IR que expresan el receptor de insulina o hepatocitos primarios de rata a concentraciones crecientes del inhibidor CHIR98014 da como resultado una estimulación de dos a tres veces de la relación de actividad GS por encima de la basal. Las concentraciones de CHIR-98014 que dan lugar a la mitad de la estimulación máxima de GS (CE50) son 106 nM y 107 nM para CHO-IR y hepatocitos de rata, respectivamente. \ n El inhibidor de GSK-3 CHIR-98014 activa la relación de actividad de GS en el músculo esquelético de tipo I aislado de Zucker delgado sensible a la insulina y de ratas ZDF resistentes a la insulina. El músculo sóleo aislado de ratas ZDF muestra una resistencia significativa a la insulina para la activación de GS pero respondió a CHIR-98014 500 nM en la misma medida (aumento del 40%) que el músculo de ratas delgadas Zucker. En particular, la activación de GS por insulina más CHIR-98014 es aditiva en el músculo de ratas Zucker delgadas y más aditiva en el músculo de las ratas ZDF. La actividad total de GS no se ve alterada ni por CHIR-98014 ni por la insulina en estas células y músculos. Mientras tanto, CHIR-98014 no influye en la respuesta a la dosis de insulina en el músculo de animales delgados. La reducción de la hiperglucemia y la eliminación mejorada de glucosa no se limitan a ratones db / db y ratas ZDF, ya que se observan resultados similares con ratones ob / ob, ratones C57BL / 6 diabéticos inducidos por dieta y ratas SHHF intolerantes a la glucosa tratadas con CHIR- 98014. Además, CHIR-98014 disminuye la fosforilación (Ser396) de la proteína tau en la corteza y el hipocampo de ratas postnatales.
orte
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Kinase assays
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Polypropylene 96-well plates are filled with 300 μL/well buffer (50 mM tris HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM dithiothreitol, 25 mM β-glycerophosphate, 1 mM NaF, 0.01% BSA, pH 7.5) containing kinase, peptide substrate, and any activators. CHIR-98014 or controls are added in 3.5 μL of DMSO, followed by 50 μL of ATP stock to yield a final concentration of 1 μM ATP in all cell-free assays. After incubation, triplicate 100-μL aliquots are transferred to Combiplate eight plates containing 100 μL/well 50 μM ATP and 20 mM EDTA. After 1 hour, the wells are rinsed five times with PBS, filled with 200 μL of scintillation fluid, sealed, left 30 min, and counted in a scintillation counter. All steps are performed at room temperature.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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CHO-IR cells
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Concentrations
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0.01-10 μM
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Incubation Time
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30 min
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Method
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CHO-IR cells expressing human insulin receptor are grown to 80% confluence in Hamm`s F12 medium with 10% fetal bovine serum and without hypoxanthine. Trypsinized cells are seeded in 6-well plates at 1 × 106 cells/well in 2 mL of medium without fetal bovine serum. After 24 hours, medium is replaced with 1 mL of serum-free medium containing GSK-3 inhibitor CHIR 98014 or control (final DMSO concentration 0.1%) for 30 min at 37 °C. Cells are lysed by freeze/thaw in 50 mM tris (pH 7.8) containing 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM NaF, 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, and 25 μg/mL leupeptin (buffer A) and centrifuged 15 min at 4 °C/14000 g. The activity ratio of GS is calculated as the GS activity in the absence of glucose-6-phosphate divided by the activity in the presence of 5 mM glucose-6-phosphate.
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Estudio con animales: [1]
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Animal Models
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db/db mice with 8-9 weeks
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Formulation
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15% Captisol/citrate vehicle
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Dosages
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30 mg/kg
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Administration
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Subcutaneously
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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\ n Información química
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Molecular Weight (MW)
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486.31
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Formula
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C20H17Cl2N9O2
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CAS No.
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252935-94-7
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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4 mg/mL
(8.22 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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N2-(2-(4-(2,4-dichlorophenyl)-5-(1H-imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)ethyl)-5-nitropyridine-2,6-diamine
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : PI3K / Akt / mTOR > Inhibidor GSK-3
