.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 653.21 17-DMAG es un potente inhibidor de HSP90 soluble en agua con IC50 de 62 nM. Fase 2. \ n Actividad biológica 17-DMAG muestra ~ 2 veces la potencia contra Hsp90 humana que 17-AAG, con IC50 de 62 nM frente a 119 nM. En las células SKBR3 y SKOV3 que sobreexpresan la proteína cliente Hsp90 Her2, el 17-DMAG provoca una regulación negativa de Her2 con una CE50 de 8 nM y 46 nM, respectivamente, así como la inducción de Hsp70 con una CE50 de 4 nM y 14 nM, respectivamente. , lo que conduce a una citotoxicidad significativa con GI50 de 29 nM y 32 nM, respectivamente, consistente con la inhibición de Hsp90. 17-DMAG en combinación con vorinostat induce sinérgicamente la apoptosis de las células de MCL cultivadas, así como de las células de MCL primarias, de manera más potente que cualquier agente solo, al atenuar notablemente los niveles de ciclina D1 y CDK4, así como de c-Myc, c- RAF y Akt. En contraste con 17-AAG, que solo es activo para IKKβ en células de leucemia linfocítica crónica (LLC), el tratamiento con 17-DMAG conduce eficazmente a la depleción de la proteína cliente Hsp90, lo que resulta en una disminución de la unión al ADN de NF-κB p50 / p65, disminución de NF- Transcripción del gen diana κB y apoptosis dependiente de caspasa. Al dirigirse a la familia NF-κB, el 17-DMAG media selectivamente la citotoxicidad dependiente de la dosis y el tiempo contra las células de CLL, pero no contra las células T normales o las células NK importantes para la vigilancia inmunitaria. El tratamiento con 17-DMAG a 5 mg / kg o 25 mg / kg tres veces por semana reduce significativamente el crecimiento tumoral de xenoinjertos de TMK-1, al reducir significativamente el área de los vasos y el número de células tumorales en proliferación en las secciones. Consistente con la inhibición de la señalización de FAK in vivo, el tratamiento con 17-DMAG a 25 mg / kg tres veces por semana suprime significativamente el crecimiento tumoral y la metástasis de xenoinjertos de ME180 y SiHa en ratones. La administración de 17-DMAG a 10 mg / kg durante 16 días disminuye significativamente el recuento de glóbulos blancos y prolonga la supervivencia en un modelo de ratón de trasplante de TCL1-SCID. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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Fluorescence polarization (FP)-based competition binding assay
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This assay utilizes a boron difluoride dipyrromethene (BODIPY) labeled geldanamycin analogue (BODIPY-AG) as a probe and measured fluorescence polarization upon binding of the probe to a protein. Native human Hsp90 protein (α + β isoforms) is isolated from HeLa cells. BODIPY-AG solution is freshly prepared in FP assay buffer (20 mM HEPES-KOH, pH 7.3, 1.0 mM EDTA, 100 mM KCl, 5.0 mM MgCl2, 0.01% NP-40, 0.1 mg/mL fresh bovine γ-globulin (BGG), 1.0 mM fresh DTT, and protease inhibitor from stock solution in DMSO. Competition curves are obtained by mixing 10 μL each of a solution containing BODIPY-AG and Hsp90, and a serial dilution of 17-DMAG freshly prepared in FP assay buffer from stock solution in DMSO. Final concentrations are 10 nM BODIPY-AG, 40 or 60 nM Hsp90, varying concentration of 17-DMAG (0.10 nM-10 μM), and ≤0.25% DMSO in a 384-well microplate. After 3 hours incubation at 30 °C, fluorescence anisotropy (γEx = 485 nm, γEm = 535 nm) is measured on an EnVision 2100 multilabel plate reader. IC50 value of 17-DMAG is obtained from the competition curves.
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Ensayo celular: [5]
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Cell lines
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Chronic lymphocytic leukemia (CLL)
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Concentrations
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Dissolved in DMSO, final concentrations ~1 μM
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Incubation Time
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24, or 48 hours
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Method
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Cells are exposed to various concentrations of 17-DMAG for 24, or 48 hours. For the assessment of cytotoxicity, MTT reagent is then added, and plates are incubated for an additional 24 hours before spectrophotometric measurement. Apoptosis is determined by staining with annexin V-fluorescein isothiocyanate and propidium iodide (PI).
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Estudio con animales: [5]
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Animal Models
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SCID mice engrafted with TCL1 leukemia cells
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Formulation
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Dissolved in DMSO
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Dosages
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10 mg/kg
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Administration
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Intraperitoneal injection 5 times per week
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Solubility
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1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80,
30 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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653.21
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Formula
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C32H48N4O8•HCl
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CAS No.
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467214-21-7
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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NSC 707545,BMS 826476 HCl,KOS 1022
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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131 mg/mL
(200.54 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80
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30 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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Geldanamycin, 17-demethoxy-17-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]-, monohydrochloride
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : Señalización citoesquelética > Inhibidor de HSP
