.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 507.59 JNK-IN-8 es el primer inhibidor de JNK irreversible para JNK1, JNK2 y JNK4 con IC50 de 4.7 nM, 18.7 nM y 1 nM, selectividad> 10 veces contra MNK2, Fms y sin inhibición de c-Kit, Met, PDGFRβ. \ n Actividad biológica JNK-IN-8 inhibe la fosforilación de c-Jun en células HeLa y A375 con CE50 de 486 nM y 338 nM, respectivamente. JNK-IN-8 muestra una mejora espectacular en la selectividad y elimina la unión a IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C y PIP5K3. JNK-IN-8 requiere Cys116 para la inhibición de JNK2. JNK-IN-8 (10 mM) suprime la fosforilación estimulada por IL-1β de c-Jun en células IL-1R, un sustrato establecido de las JNK. JNK-IN-8 se une covalentemente a las isoformas de JNK provocando un pequeño retraso en la movilidad electroforética de las isoformas de JNK. Se descubre que JNK-IN-8 inhibe la quinasa JNK mediante el perfil de selectividad de quinasa de base amplia de una biblioteca de inhibidores de quinasa de acrilamida basada en la estructura de imatinib utilizando el enfoque KinomeScan. JNK-IN-8 posee una regioquímica distinta de las subestructuras 1,4-dianilina y ácido 1,3-aminobenzoico en relación con imatinib y utiliza una ojiva N, N-dimetil butenoico acetamida para dirigirse covalentemente a Cys154. JNK-IN-8 adopta una conformación de unión de tipo I en forma de L para acceder a Cys 154 ubicada hacia el borde del sitio de unión de ATP. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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Binding Kinetics Assay
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Binding kinetics assay A375 cells are pretreated with 1 μM JNK-IN-8 for the indicated amounts of time. Remove the medium and wash three times with PBS. Resuspend the cell pellet with 1 mL Lysis Buffer (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, and Protease Inhibitor Cocktail). Rotate end to end for 30 min at 4℃. Lysates are cleared by centrifugation at 1.4×104 rpm for 15 min in the Eppendorf. The cleared lysates are gel filtered into Kinase Buffer (0.1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, Protease Inhibitor Cocktail) using 10DG columns. The total protein concentration of the gel-filtered lysate should be around 5–15 mg/ml. Cell lysate is labeled with the probe from ActivX at 5 μM for 1 hour. Samples are reduced with DTT, and cysteines are blocked with iodoacetamide and gel filtered to remove excess reagents and exchange the buffer. Add 1 vol of 2× Binding Buffer (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) and 50 μL streptavidin bead slurry, and rotate end to end for 2 hours, centrifuge at 7,000 rpm for 2 min. Wash three times with 1× Binding Buffer and three times with PBS. Add 30 μL 1× sample buffer to beads; heat samples at 95℃ for 10 min. Run samples on an SDS-PAGE gel at 110V. After transferred, the membrane is immunoblotted with JNK antibody.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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507.59
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Formula
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C29H29N7O2
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CAS No.
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1410880-22-6
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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100 mg/mL
heating
(197 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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Benzamide, 3-[[4-(dimethylamino)-1-oxo-2-buten-1-yl]amino]-N-[3-methyl-4-[[4-(3-pyridinyl)-2-pyrimidinyl]amino]phenyl]-
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : MAPK > Inhibidor de JNK
