.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} MNS (3,4-metil-enedioxi-β-nitroestireno) inhibe completamente 2 μM U46619- (un imitador de tromboxano A2), 5 μM ADP-, 100 μM ácido araquidónico- (AA), 10 μg / ml de colágeno y 0,1 U / ml de agregación plaquetaria inducida por trombina de una manera dependiente de la concentración con IC50 de 2,1 μM, 4,1 μM, 5,8 μM, 7,0 μM y 12,7 μM, respectivamente. MNS inhibe la agregación plaquetaria causada por el ionóforo de calcio A23187 (1 μM) o el activador de la proteína quinasa C (PKC) PDBu (200 nM) con IC50 de 25,9 μM y 4,8 μM, respectivamente. MNS (20 µM) disminuye la expresión de P-selectina inducida por dtrombina en plaquetas a niveles comparables a los observados en plaquetas tratadas con PGE1. MNS (20 μM) inhibe notablemente la fosforilación de MARCKS inducida por trombina, pero no por PDBu, en plaquetas. MNS (20 μM) inhibe notablemente la fosforilación de tirosina de proteínas a los 0,5 min o 3 min después de la estimulación con trombina o colágeno en plaquetas. MNS estimula la degradación de UbG76V-GFP y ODD-Luc con IC50 de 1,6 μM y 5,9 μM, respectivamente. MNS inhibe la acumulación inducida por MG132 del informador con IC50 de 2,1 µM. MNS inhibe bacterias Gram-positivas (Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis) y Gram-negativas (Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa) con concentraciones inhibitorias mínimas (CMI) de 128 mg / L. MNS es mucho más potente que la genisteína para inhibir la agregación plaquetaria y la fosforilación de tirosina de proteínas. El MNS (3,4-metilendioxi-β-nitroestireno) es igualmente potente como inhibidor de la agregación plaquetaria que el 3,4-dimetoxi-β-nitroestireno. La concentración de MNS (20 μM) previene de manera dependiente la liberación de ATP de las plaquetas estimuladas por la trombina o el colágeno. MNS (20 μM) inhibe la unión de PAC-1 inducida por trombina a plaquetas humanas. El grupo nitro de MNS (3,4-metilendioxi-β-nitroestireno) es esencial por su efecto antiplaquetario. \ n Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
|
Tyrosine Kinase Assay
|
For immune complex kinase assay, platelets treated with MNS, PP1, or piceatannol are lysed and immunoprecipitated with either anti-Src or anti-Syk antibody. In some experiments, recombinant human Src, Syk, FAK, or JAK2 is used and treated with MNS or tyrosine kinase inhibitors for 5 min. The activity of the immunoprecipitated kinases or the recombinant enzymes is determined by using a tyrosine kinase assay kit. Samples are incubated with biotinylated poly[Glu:Tyr] (4:1), an exogenous substrate, in kinase assay buffer (20 mM HEPES, 5 mM MgCl2, 5 mM MnCl2, 0.1 mM sodium orthovanadate, and 1 mM dithiothreitol) for 37℃ for 30 to 45 min. After stopping the enzyme reaction with EDTA (final concentration of 20 mM), both the phosphorylated and dephosphorylated substrates are immobilized by binding to the streptavidin-coated plate. The fraction of phosphorylated substrate is determined using a phosphotyrosine monoclonal antibody conjugated to HRP and an ensuing chromogenic substrate reaction.
|
Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Información química
|
Molecular Weight (MW)
|
193.16
|
|
Formula
|
C9H7NO4
|
|
CAS No.
|
1485-00-3
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
N/A
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
39 mg/mL
(201.9 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
|
Chemical Name
|
3,4-Methylenedioxy-β-nitrostyrene
|
orte
Grupos de Producto : Ubiquitina > Inhibidor p97
