PP121 1092788-83-4

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 319.36 PP-121 es un inhibidor de múltiples objetivos de PDGFR, Hck, mTOR, VEGFR2, Src y Abl con IC50 de 2 nM, 8 nM, 10 nM, 12 nM, 14 nM y 18 nM, también inhibe DNA-PK con IC50 de 60 nM. \ n La selectividad de la actividad biológica PP-121 interactúa dentro de un bolsillo hidrófobo que se conserva entre las tirosina quinasas y las PI3K, no entre las serina-treonina quinasas. PP-121 crea un enlace de hidrógeno a Glu310 en Src, sustituyendo eficazmente el papel estructural de la lisina catalítica y dando como resultado el orden de la hélice C y la estabilización de una conformación activa. PP-121 también inhibe otras PI3K, incluidas p110α y DNA-PK con IC50 de 52 nM y 60 nM, respectivamente. \ n PP-121 bloquea potente y dependiente de la dosis la fosforilación de Akt, p70S6K y S6 en dos líneas celulares de glioblastoma, U87 y LN229. PP-121 inhibe de forma potente la proliferación de un subconjunto de líneas de células tumorales mediante la inhibición directa de PI3K y mTOR. PP-121 induce una detención de G0 / G1 en células LN220, U87 y Seg1. PP-121 también bloquea la fosforilación de tirosina inducida por v-Src en células NIH3T3 transformadas con v-Src (Thr338). \ n PP-121 podría restaurar la tinción de fibras de estrés de actina en células NIH3T3 transformadas con v-Src (Thr338). PP-121 a una concentración baja de 40 nM inhibe la autofosforilación de Ret en células de carcinoma de tiroides TT que expresan el mutante Ret oncogénico C634W35. PP-121 inhibe la proliferación celular con IC50 de 50 nM en células de carcinoma de tiroides TT. \ n PP-121 inhibe la proliferación celular estimulada solo con VEGF con IC50 de 41 nM en células endoteliales de vena umbilical humana (HUVEC). PP-121 inhibe directamente la fosforilación de tirosina inducida por Bcr-Abl, lo que resulta en apoptosis inducida por fármacos en células K562 y una combinación de apoptosis y detención del ciclo celular en células BaF3 que expresan Bcr-Abl. Ensayos de quinasa Los dominios de quinasa purificados se incuban con PP-121 a diluciones de 2 o 4 veces en un intervalo de concentración de 1 nM-50 µM o con vehículo (DMSO al 0,1%) en presencia de ATP 10 µM, 2,5 µCi de γ-32P -ATP y sustrato. Las reacciones se terminan colocando sobre membranas de nitrocelulosa o fosfocelulosa, dependiendo del sustrato; esta membrana se lava luego de 5 a 6 veces para eliminar la radiactividad no unida y se seca. La radiactividad transferida se cuantifica mediante imágenes de fósforo y los valores de CI50 se calculan ajustando los datos a una respuesta de dosis sigmoidea utilizando el software Prism. \ N \ n Método Para el análisis de transferencia Western, las células se cultivan en placas de 12 pocillos y se tratan con PP-121 en el tiempo indicado. concentraciones o vehículo (0,1% DMSO). Las células tratadas se lisan, los lisados ​​se resuelven mediante SDS-PAGE, se transfieren a nitrocelulosa y se transfieren. Para los ensayos de proliferación celular, las células se cultivan en placas de 96 pocillos y se tratan con PP-121 a diluciones de 4 veces (10 µM - 0,040 µM) o vehículo (DMSO al 0,1%). \ n Después de 72 horas, las células se exponen a sal sódica de resazurina (22 µM) y se cuantifica la fluorescencia. Los valores de CI50 se calculan utilizando el software Prism. Para los ensayos de proliferación que implican el recuento de células individuales, las células no adherentes se siembran en placas a baja densidad (confluencia del 3-5%) y se tratan con PP-121 (2,5 µM) o vehículo (DMSO al 0,1%). Las células se diluyen en azul tripán diariamente y las células viables se cuentan usando un hemocitómetro. \ n Para el análisis de apoptosis y ciclo celular, las células se tratan con la concentración indicada de PP-121 o vehículo (DMSO al 0,1%) durante 24 a 72 horas. Las células se tiñen en vivo con AnnexinV-FITC o se fijan con etanol y se tiñen con yoduro de propidio. Las poblaciones de células se separan usando un citómetro de flujo FacsCalibur; Los datos se recopilan utilizando el software CellQuest Pro y se analizan con el software ModFit o FlowJo.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de PDGFR