.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 618,81 Volasertib (BI 6727) es un inhibidor de Plk1 muy potente con IC50 de 0,87 nM. Muestra una selectividad 6 y 65 veces mayor contra Plk2 y Plk3. Fase 3. Actividad biológica Como BI2536, BI6727 es un inhibidor de quinasa competitivo con ATP de la clase de compuestos de dihidropteridinona. Además de Plk1, BI6727 también inhibe de forma potente dos quinasas estrechamente relacionadas Plk2 y Plk3 con IC50 de 5 nM y 56 nM, respectivamente. BI6727 a concentraciones de hasta 10 μM no muestra actividad inhibidora contra un panel de> 50 otras quinasas. BI6727 inhibe la proliferación de múltiples líneas celulares derivadas de varios tejidos cancerosos, incluidas las células HCT116, NCI-H460, BRO, GRANTA-519, HL-60, THP-1 y Raji con CE50 de 23 nM, 21 nM, 11 nM, 15 nM, 32 nM, 36 nM y 37 nM, respectivamente. El tratamiento con BI6727 (100 nM) en células NCI-H460 induce una acumulación de células mitóticas con husos monopolares y tinción positiva para la histona H3 fosfoserina 10, lo que confirma que las células se detienen temprano en la fase M, seguido de inducción de apoptosis. Las concentraciones nanomolares bajas de BI6727 muestran una potente actividad inhibidora contra las células iniciadoras de tumores del neuroblastoma (NB) (NB TIC) con una CE50 de 21 nM, mientras que solo las concentraciones micromolares de BI6727 son citotóxicas para las células madre neurales pediátricas normales. BI6727 induce la detención del crecimiento de células de meduloblastoma Daoy y ONS-76 similar a BI 2536. La administración de BI6727 inhibe significativamente el crecimiento de múltiples xenoinjertos de carcinoma humano, incluidos HCT116, NCI-H460 y carcinoma de colon CXB1 resistente a taxanos, acompañado de un aumento en el índice mitótico así como un aumento de la apoptosis. En estudios in vivo, BI6727 muestra una mejor toxicidad y perfil farmacocinético en comparación con BI2536. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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In vitro kinase assays
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Recombinant human Plk1 (residues 1-603) is expressed as NH2-terminal, GST-tagged fusion protein using a baculoviral expression system and purified by affinity chromatography using glutathione-agarose. Enzyme activity assays for Plk1 are done in the presence of serially diluted BI6727 using 20 ng of recombinant kinase and 10 μg casein from bovine milk as substrate. Kinase reactions are done in a final volume of 60 μL for 45 minutes at 30 °C [15 mM MgCl2, 25 mM MOPS (pH 7.0), 1 mM DTT, 1% DMSO, 7.5 μM ATP, 0.3 μCi γ-32P-ATP]. Reactions are terminated by the addition of 125 μL of ice-cold 5% TCA. After transferring the precipitates to MultiScreen mixed ester cellulose filter plates, plates are washed with 1% TCA and quantified radiometrically. Dose-response curves are used for calculating IC50 value.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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HCT116, NCI-H460, BRO, GRANTA-519, HL-60, THP-1, and Raji
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Concentrations
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Dissolved in DMSO, final concentrations ~1 μM
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Incubation Time
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24, 48, and 72 hours
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Method
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Cell proliferation assays are done by incubating cells in the presence of various concentrations of BI6727 for 24, 48, and 72 hours and cell growth is assessed by measuring Alamar blue dye conversion in a fluorescence spectrophotometer. Effective concentrations at which cellular growth is inhibited by 50% (EC50) are extrapolated from the dose-response curve fit. To determine the DNA content, cell suspensions are fixed in 80% ethanol, treated for 5 minutes with 0.25% Triton X-100 in PBS, and incubated with 0.1% RNase and 10 μg/mL propidium iodide in PBS for 20 minutes at room temperature. Cell cycle profiles are determined by flow cytometric analysis.
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Estudio con animales: [1]
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Animal Models
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Female BomTac:NMRI-Foxn1nu mice grafted s.c. with HCT116, NCI-H460, or CXB1 cells
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Formulation
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Formulated in hydrochloric acid (0.1 N), and diluted with 0.9% NaCl, or suspended in 0.5% Natrosol 250 hydroxyethyl-cellulose
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Dosages
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~25 mg/kg/day
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Administration
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Injected i.v., or given intragastrally via gavage needle
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Solubility
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30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol,
30 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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618.81
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Formula
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C34H50N8O3
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CAS No.
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755038-65-4
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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50 mg/mL
(80.8 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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124 mg/mL
(200.38 mM)
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In vivo
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30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
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30 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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N-((1r,4r)-4-(4-(cyclopropylmethyl)piperazin-1-yl)cyclohexyl)-4-((R)-7-ethyl-8-isopropyl-5-methyl-6-oxo-5,6,7,8-tetrahydropteridin-2-ylamino)-3-methoxybenzamide
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : Ciclo celular > Inhibidor de PLK
