.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 517.46 CEP-32496 es un inhibidor muy potente de BRAF (V600E / WT) y c-Raf con Kd de 14 nM / 36 nM y 39 nM, también potente para Abl-1, c-Kit, Ret, PDGFRβ y VEGFR2, respectivamente; afinidad insignificante por MEK-1, MEK-2, ERK-1 y ERK-2. Fase 1/2. \ N Actividad biológica CEP-32496 inhibe la proliferación de células A375 (BRAFV600E) con CE50 de 78 nM. CEP-32496 exhibe una citotoxicidad más sensible para las líneas de células tumorales (A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 y HT-144) que expresan BRAF mutante que las que expresan BRAF de tipo salvaje (HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145 y PC-3). CEP-32496 inhibe la fosforilación de proteína activada por mitógenos (MAP) / quinasa regulada por señal extracelular (ER) (MEK) (pMEK) en líneas celulares de melanoma humano (A375) y cáncer colorrectal (Colo-205) con IC50 de 78 nM y 60 nM, respectivamente. CEP-32496 exhibe buena estabilidad en preparaciones microsomales de hígado de ratón, perro, mono y humano con valores de aclaramiento intrínseco medidos de 1/2> 60 min en todos los ensayos. CEP-32496 (30 mg / kg, por vía oral, BID) exhibe estasis tumoral y una incidencia del 40% de regresiones tumorales parciales (RP) en el modelo de ratón de xenoinjerto Colo-205, mientras que el grupo de dosis de 100 mg / kg exhibe estasis tumoral y una Incidencia del 80% de RP. CEP-32496 (30 mg / kg, por vía oral, dos veces al día) conduce a una inhibición del 50% y del 75% de la pMEK normalizada en los lisados tumorales a las 2 horas y 6 horas posteriores a la dosis, respectivamente, mientras que una dosis de 55 mg / kg da como resultado una inhibición del 75% al 57% de pMEK entre 2 horas y 10 horas después de la administración en un modelo de ratón con xenoinjerto Colo-205. CEP-32496 está biodisponible por vía oral en múltiples especies preclínicas (> 95% en ratas, perros y monos). CEP-32496 (100 mg / kg) da como resultado la inhibición de pMEK y pERK y estasis y regresiones tumorales sostenidas en xenoinjertos de carcinoma de colon BRAF (V600E) en ratones desnudos. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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Binding assay
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Kinases are produced displayed on T7 phage or by expression in HEK-293 cells and tagged with DNA. Binding reactions are performed at room temperature for 1 hour, and the fraction of kinase not bound to test compound is determined by capture with an immobilized affinity ligand and quantitation by quantitative PCR. Each kinase is tested individually against CEP-32496. Kd values are determined using eleven serial 3-fold dilutions and presented as mean values from experiments performed in duplicate. Variability between individual values is less than 2-fold.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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A375 cell lines
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Concentrations
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78 nM
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Incubation Time
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72 hours
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Method
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Cells are seeded at 104 cells per well in DMEM with 10% fetal calf serum and allowed to attach. The cells are washed with PBS and switched to DMEM with 0.5% of serum and incubated overnight. CEP-32496 is then added at various concentrations with a final DMSO concentration of 0.5% and incubated for 72 h. At the end of incubation, a Cell Titer Blue is added per instructions, and incubation is continued for 3 hours. Remaining viable cells are quantified by measuring the strength of the fluorescence signal using SoftMax Pro (excitation at 560 nm and emission at 590 nm). IC50 values are derived using a 9-point curve fitted with Igor Pro and are presented as mean values from experiments performed in duplicate. Variability between individual values is less than 2-fold.
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Estudio con animales: [1]
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Animal Models
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Colo-205 xenograft mouse model
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Formulation
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22% HPβCD
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Dosages
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100 mg/kg
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Administration
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oral gavage
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Solubility
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15% Captisol,
15 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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517.46
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Formula
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C24H22F3N5O5
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CAS No.
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1188910-76-0
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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9 mg/mL
(17.39 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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15% Captisol
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15 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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Urea, N-[3-[(6,7-dimethoxy-4-quinazolinyl)oxy]phenyl]-N-[5-(2,2,2-trifluoro-1,1-dimethylethyl)-3-isoxazolyl]-
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : MAPK > Inhibidor de Raf
