RKI-1447 1342278-01-6

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 326.37 RKI-1447 es un potente inhibidor de ROCK1 y ROCK2, con IC50 de 14.5 nM y 6.2 nM, respectivamente, tiene actividades antiinvasivas y antitumorales. \ n Biológico La actividad RKI-1447 es una piridiltiazolil-urea permeable a las células que actúa como un potente inhibidor de la quinasa Rho que se dirige al sitio ATP, que muestra una potencia muy reducida contra PKA, PKN1 / PRK1, p70S6K / RPS6kB1, AKT1, MRCKa / CDC42BPA (85,5%, 80,5%, 61,9%, 56,0% y 50,4% de inhibición, respectivamente, por 1 µM de RKI-1447) u otras 15 quinasas. Las estructuras cristalinas del complejo RKI-1447 / ROCK1 revelan que RKI-1447 es un inhibidor de quinasa de tipo I que se une al sitio de unión de ATP a través de interacciones con la región bisagra y el motivo DFG. RKI-1447 suprime la fosforilación de los sustratos de ROCK MLC-2 y MYPT-1 en las células cancerosas humanas, pero no tuvo ningún efecto sobre los niveles de fosforilación de las cinasas AKT, MEK y S6 en concentraciones tan altas como 10 μM. RKI-1447 también es altamente selectivo para inhibir la reorganización del citoesqueleto mediada por ROCK (formación de fibras de estrés de actina) después de la estimulación con LPA, pero no afecta la formación de lamelipodios y filopodios meditados por PAK después de la estimulación con PDGF y bradicinina. RKI-1447 inhibe la migración, la invasión y el crecimiento tumoral independiente del anclaje de las células de cáncer de mama. RKI-1447 es muy eficaz para inhibir el crecimiento de tumores mamarios en un modelo de ratón transgénico. Los tumores de los ratones tratados con RKI-1447 aumentan de tamaño con un cambio porcentual medio en el volumen del tumor de sólo el 8,8%. Por tanto, RKI-1447 inhibió el crecimiento del tumor mamario en un 87% y, en promedio, los tumores mamarios comparados con los tumores de los ratones tratados con el vehículo de control, los ratones tratados con RKI-1447 son 7,7 veces más pequeños. Los tratamientos con RKI-1447 no dan como resultado la pérdida de peso del ratón. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [2]

Z-Lyte FRET kinase assay

Kinase inhibition is measured using the Invitrogen Z-Lyte® FRET kinase assay with Ser/Thr 13 peptide substrate based on the myosin light chain sequence KKRPQRRYSNVF. Compounds are tested on three separate days with 8 point dilutions performed in duplicate to determine average IC50 values. The assay conditions are optimized to 15 μL of kinase reaction volume with 5 ng of enzyme in 50 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, and 0.01% Brij-35. The reaction is incubated for 1 h at room temperature in the presence of 1.5 μM of peptide substrate with 12.5 μM of ATP (for ROCK1) or 2 μM of substrate with 50 μM of ATP (for ROCK2). The reaction is then stopped and the ratio of phosphorylated to unphosphorylated peptides is determined by selective cleavage of only the unphosphorylated peptide as described by the manufacturer. This is followed by excitation of coumarin at 400 nm resulting in emission at 445 nm and energy transfer to fluorescein and final emission at 520 nm. The substrate contains both coumarin and fluorescein and only uncleaved phosphorylated substrate will undergo FRET. The ratio of the signals at 445 nm and 520 nm is measured using a Wallac EnVision Plate Reader, model 2102 plate-reader.

Ensayo celular: [1]

Cell lines	MDA-MB-231
Concentrations	~600 μM
Incubation Time	72 h
Method	Cells are plated in a 96 well tissue culture plate (1200 cells per well) and incubated for 24 hours. After incubation the cells are treated with vehicle or increasing concentrations of RKI-1447 for 72 hours. After incubation, freshly prepared MTT (2mg/ml) is added to each well and incubated for 3 hours. After incubation the plates are read at 540 nm.

Estudio con animales: [1]

Animal Models	MMTV/neu transgenic mice [FVB/N-Tg (MMTVneu) 202 Mul/J]
Formulation	20%-2-hydroxypropyl-betacyclodextrin(HPCD)
Dosages	200 mpk/day
Administration	i.p.
Solubility	15% Captisol, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversión de diferentes modelos de animales basados ​​en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Información química

Molecular Weight (MW)	326.37
Formula	C16H14N4O2S
CAS No.	1342278-01-6

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	65 mg/mL (199.16 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	15% Captisol	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	Urea, N-[(3-hydroxyphenyl)methyl]-N'-[4-(4-pyridinyl)-2-thiazolyl]-

Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular

Grupos de Producto : Ciclo celular > Inhibidor de ROCA