GSK429286A 864082-47-3

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 432,37 GSK429286A es un inhibidor selectivo de ROCK1 y ROCK2 con IC50 de 14 nM y 63 nM, respectivamente. \ n Actividad biológica GSK429286A inhibe levemente RSK y p70S6K con IC50 de 0,78 µM y 1,94 µM, respectivamente. GSK429286A inhibe significativamente la dilatación del anillo aórtico de rata con IC50 de 190 nM. GSK429286A a 1 μM reduce la actividad de ROCK2 más de 20 veces, en condiciones en las que la única otra quinasa probada que se inhibe significativamente es MSK1 cuya actividad se reduce ~ 5 veces. GSK429286A es un inhibidor de ROCK2 más selectivo que el inhibidor de ROCK Y-27632 ampliamente utilizado según lo evaluado en el panel de especificidad de quinasa, y no inhibe significativamente LRRK2 incluso en dosis tan altas como 30 μM (500 veces más alto que el IC50 de inhibición de ROCK2) . Al igual que GSK269962A pero no sunitinib, el tratamiento con GSK429286A a 10 μM elimina la fosforilación basal o mutante G14V-Rho inducida de MYPT en Thr850 en células HEK-293 en una extensión similar a H-1152 e Y-27632, consistente con ROCK que media esta fosforilación, mientras que GSK429286A no inhibe la fosforilación de proteínas ERM ni en presencia ni en ausencia de G14V-Rho. GSK429286A tiene un 61% de biodisponibilidad oral en ratas macho Sprague-Dawley. La administración oral de GSK429286A en dosis únicas de 3-30 mg / kg reduce drásticamente la presión arterial media en las ratas espontáneamente hipertensas (SHR) de una manera dependiente de la dosis, con una disminución máxima de 50 mmHg después de aproximadamente 2 horas de tratamiento a una dosis de 30 mg / kg. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]

ROCK1 kinase assays

GSK429286A is dissolved at 10 mM in 100% DMSO, with subsequent serial dilution in 100% DMSO. ROCK1 inhibitor activity is determined using human recombinant His-tag ROCK1 kinase domain (amino acid 2-543) expressed in Sf9 cells. Assays of ROCK1 activity are performed in opaque, white walled, 384 well plates, in a total assay volume of 20 μL. The assays contain: 1 nM hROCK1; 1 μM biotinylated peptide (biotin-Ahx-AKRRRLSSLRA-CONH2); 1 μM ATP; 1.85 kBq per well ATP(γ-33P); 25 mM Hepes pH 7.4; 15 mM MgCl2; 0.015% BSA; increasing concentrations of GSK429286A ranging from 50 μM to 0.8 nM. The reactions are incubated at 22°C for 120 minutes, and then terminated by the addition of a 50 μL solution containing 60 mM EDTA and streptavidin PVT SPA beads. The SPA beads are added to a concentration of 0.14 mg per well. The plates are allowed to incubate at 22°C for 10 minutes before centrifugation at 1500 rpm for 1 minute. P33 incorporation is quantified by scintillation counting in a Packard TopCount. IC50 value is calculated by bespoke curve fitting software.

ROCK2 kinase assays

ROCK2 kinase assays are set up in a total volume of 40 μL with recombinant His6-ROCK2-(2-543) (80 ng, corresponding to 30 nM ROCK2 in the final kinase assay) in 50 mM Tris/HCl (pH 7.5), 0.1 mM EGTA, 10 mM MgCl2, 0.1 mM [γ-32P]ATP (~5

Estudio con animales: [1]

Animal Models	Male spontaneously hypertensive rats (SHRs)
Formulation	Formulated in 6% Hydroxypropyl-β-Cyclodextrin (pH4.0) and 5% DMSO solution
Dosages	~30 mg/kg
Administration	Oral gavage
Solubility	15% Captisol/citrate vehicle, 15 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversión de diferentes modelos de animales basados ​​en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

\ n Información química

Molecular Weight (MW)	432.37
Formula	C21H16F4N4O2
CAS No.	864082-47-3

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms	RHO-15

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	87 mg/mL (201.21 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	4 mg/mL (9.25 mM)
	In vivo	15% Captisol/citrate vehicle	15 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	N-(6-fluoro-1H-indazol-5-yl)-2-methyl-6-oxo-4-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,4,5,6-tetrahydropyridine-3-carboxamide

Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular

Grupos de Producto : Ciclo celular > Inhibidor de ROCA