A-769662 844499-71-4

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 360.39 A-769662 es un potente activador de AMPK reversible con EC50 de 0.8 μM, poco efecto en la actividad de GPPasa / FBPasa. \ n A-769662 estimula AMPK de hígado de rata parcialmente purificado con EC50 con 0,8 μM. A-769662 activa AMPK purificada de múltiples tejidos y especies de una manera sensible a la dosis con variaciones modestas en las CE50 observadas. Las CE50 determinadas para A-769662 usando extractos de AMPK parcialmente purificados de corazón de rata, músculo de rata o células de riñón embrionario humano (HEK) son 2,2 mM, 1,9 mM o 1,1 mM, respectivamente. Un tratamiento de 4 horas de hepatocitos primarios de rata con A-769662 aumenta de manera dependiente de la dosis la fosforilación de ACC, que correlaciona la inhibición de la síntesis de ácidos grasos con una CI50 de 3,2 μM. A-769662 también inhibe la síntesis de ácidos grasos en hepatocitos de ratón con IC50 con 3,6 µM [1]. A-769662 activa AMPK tanto alostéricamente como inhibiendo la desfosforilación de AMPK en Thr-172, similar a los efectos de AMP. A-769662 inhibe la función proteasomal mediante un mecanismo independiente de AMPK. A-769662 afecta la actividad in vitro de proteasomas 26S purificados pero no la actividad in vitro de proteasomas 20S purificados. A-769662 tiene efectos tóxicos sobre las células MEF. Una investigación reciente muestra que A-769662 inhibe la proliferación celular y la síntesis de ADN. El tratamiento a corto plazo de ratas Sprague Dawley normales con A-769662 disminuye los niveles de malonil CoA en el hígado y la relación de intercambio respiratorio, VCO2 / VO2, lo que indica un aumento de la tasa de oxidación de ácidos grasos en todo el cuerpo. El tratamiento de ratones ob / ob con 30 mg / kg bid A-769662 disminuye la expresión hepática de PEPCK, G6Pase y FAS, disminuye la glucosa plasmática en un 40%, reduce la ganancia de peso corporal y disminuye significativamente los niveles de triglicéridos en plasma y en hígado. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]

96-well AMPK assay

AMPK activity is measured by monitoring phosphorylation of the SAMS peptide substrate (20 mM in standard assays and 100 mM in additivity assays) following a previously described protocol (Anderson et al., 2004). To determine whether A-769662-induced AMPK activation occurs in a reversible manner, AMP or A-769662 are preincubated with rat liver AMPK for 10 minutes at 20 times standard assay concentrations prior to dilution and measurement of AMPK activity.

Fatty Acid Synthesis Assay

Primary rat hepatocytes are isolated and plated at 5 × 104 cells per well on BioCoat, collagen-coated, black-walled 96-well plates in DMEM supplemented with 10% FBS, 5 mM glucose, 1 mM sodium pyruvate, 2 mM L-glutamine, 25 mM HEPES, 0.1 m

Ensayo celular: [3]

Cell lines	MEF cells
Concentrations	300 μM
Incubation Time	24 hours
Method	Cell viability of MEF cells treated or not with A-769662 is performed as follows: cells are harvested by trypsinization and incubated with 0.5 mg/mL RNase and 50 μg/mL propidium iodine at room temperature in the dark; cell viability is analyzed by flow cytometry using a FACScanto flow cytometer, using an excitation laser at 488 nm and a propidium iodine fluorescence detection at 600 nm. To determine the proportion of cells in each phase of the cell cycle, cells are harvested by trypsinization, collected by centrifugation, washed in PBS and fixed overnight in 80% ethanol at -20 °C. Subsequently, these fixed cells are centrifuged to remove the fixative and incubated for 20 minutes in the dark at room temperature in PBS containing 0.5 mg/mL RNase and 50 μg/mL propidium iodine. Flow cytometry analysis is performed as above. The proportion of cells in G1, S, and G2 is determined using the MODFIT program. Cell culture pictures are taken at the indicated times using a camera coupled to an inverted microscope with a 20 × objective.

Estudio con animales: [1]

Animal Models	Sprague Dawley rats
Formulation	A-769662 is dissolved in DMSO.
Dosages	30 mg/kg
Administration	Administered via i.p.
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversión de diferentes modelos de animales basados ​​en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Información química

Molecular Weight (MW)	360.39
Formula	C20H12N2O3S
CAS No.	844499-71-4

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	72 mg/mL (199.78 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	Thieno[2,3-b]pyridine-5-carbonitrile, 6,7-dihydro-4-hydroxy-3-(2'-hydroxy[1,1'-biphenyl]-4-yl)-6-oxo-

Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular

Grupos de Producto : PI3K / Akt / mTOR > Inhibidor de AMPK