ZM 447439 331771-20-1

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 513.59 ZM 447439 es un inhibidor selectivo y competitivo con ATP para Aurora A y Aurora B con IC50 de 110 nM y 130 nM, respectivamente. Es más de 8 veces más selectivo para Aurora A / B que MEK1, Src, Lck y tiene poco efecto contra CDK1 / 2/4, Plk1, Chk1, etc. \ n Actividad biológica In vitro, ZM-447439 inhibe selectivamente el recombinante humano Aurora A y B con valores de CI50 de 110 y 130 nM, respectivamente, mientras que otras proteína quinasas de diversos tipos estructurales, incluidas las quinasas mitóticas CDK1 y PLK1, se inhiben con valores de CI50> 10 µM. El inhibidor de la quinasa Aurora, ZM-447439 inhibe de forma dependiente del tiempo y de la dosis el crecimiento de las tres líneas celulares con valores de CI50 de 3 μM (BON), 0,9 μM (QGP-1) y 3 μM (MIP-101) después de 72 horas de exposición continua. Además, ZM-447439 induce poderosamente la apoptosis celular al promover la fragmentación del ADN y la activación de las caspasas 3 y 7, y detiene las células GEP-NET en la fase G0 / G1 y G2 / M del ciclo celular. En el embrión de ratón, la inhibición de la actividad de la quinasa Aurora por ZM-447439 da como resultado anomalías durante la mitosis al regular la fosforilación de la histona H3 serina 10 (H3S10Ph) de G2 a la metafase con diferentes perturbaciones en cada ciclo embrionario. Un estudio reciente muestra que ZM-447439 exhibe un efecto inhibidor del crecimiento y proapoptótico en las células SiHa del cáncer de cuello uterino y mejora la quimiosensibilidad al cisplatino. \ n Ensayos de quinasa in vitro Las Aurora A y B recombinantes se expresan como proteínas de fusión etiquetadas con His6 del extremo NH2 utilizando un sistema de expresión de baculovirus. Aurora A se purifica mediante cromatografía de afinidad usando agarosa Ni-NTA, y Aurora B se purifica mediante cromatografía de intercambio iónico usando CM Sepharose Fast Flow. Se añade 1 ng de enzima recombinante purificada a un cóctel de reacción que contiene Tris-HCl 25 mM, pH 7,5, KCl 12,5 mM, NaF 2,5 mM, DTT 0,6 mM, MnCl2 6,25 mM, sustrato peptídico 10 μM, 10 μM para Aurora A o 5 μM ATP para Aurora B y 0,2 μCi γ- [33P] ATP (actividad específica ≥2,500 Ci / mmol), y luego se incuba a temperatura ambiente durante 60 minutos. Las reacciones se detienen mediante la adición de ácido fosfórico al 20% y los productos se capturan en filtros de nitrocelulosa P30 y se analizan para la incorporación de 33P con un contador BetaplateTM. No se utilizaron valores de control de enzima ni de compuesto para determinar la concentración de ZM447439, que dio un 50% de inhibición de la actividad enzimática. Más detalles están disponibles a pedido de Nicholas Keen. Método El número de células se evalúa mediante tinción con violeta cristal. En resumen, las células en placas de 96 pocillos se fijan con glutaraldehído al 1%. Luego, las células se tiñen con violeta cristal al 0,1%. El tinte no unido se elimina lavando con agua. El cristal violeta unido se solubiliza con Triton X-100 al 0,2%. La extinción de luz que aumenta linealmente con el número de células se analiza a 570 nm usando un lector de ELISA.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de la quinasa Aurora