PF-03814735 942487-16-3

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 474.48 PF-03814735 es un inhibidor novedoso, potente y reversible de Aurora A / B con IC50 de 0.8 nM / 5 nM, es menos potente para Flt3, FAK, TrkA, y mínimamente activo para Met y FGFR1. Fase 1. \ n Actividad biológica En células intactas, la actividad inhibidora de PF-03814735 sobre las quinasas Aurora1 y Aurora2 reduce los niveles de fosfo-Aurora1 (Thr 232, un marcador sensible de la actividad de Aurora1, con IC50 ~ 20 nM), fosfohistona H3 (con CI50 ~ 50 nM) y fosfo-Aurora2 (con CI50 ~ 150 nM). PF-03814735 produce un bloqueo en la citocinesis, lo que resulta en la inhibición de la proliferación celular y la formación de células poliploides multinucleadas. Una investigación reciente indica cáncer de pulmón de células pequeñas (SCLC) y, en menor medida, las líneas de cáncer de colon son muy sensibles al PF-03814735. El estado de la familia de genes Myc y los miembros de la vía del retinoblastoma se correlaciona significativamente con la eficacia de PF-03814735. La dosificación oral una vez al día de ≥20 mg / kg de PF-03814735 durante 10 días a ratones que llevaban xenoinjertos de HCT-116 dio como resultado una inhibición del crecimiento tumoral estadísticamente significativa y dependiente de la dosis de ≥50% en relación con los ratones tratados con vehículo. La inhibición se asocia con una reducción en los niveles de histona H3 fosforilada. Se observa una eficacia antitumoral de agente único significativo en cinco modelos de tumor de xenoinjerto adicionales, incluido el carcinoma de ovario A2780, el carcinoma de mama MDA-MB-231, los carcinomas colorrectales colo-205 y SW620 y la leucemia promielocítica aguda HL-60. Los experimentos in vivo con dos modelos de xenoinjerto de SCLC confirman la sensibilidad de los modelos dirigidos por genes Myc a PF-03814735 y una posible dependencia del programa de tumores dirigidos por MYC / c-Myc. \ n Ensayos de quinasa recombinante Las proteínas Aurora1 y Aurora2 se producen como proteínas recombinantes de etiqueta His de longitud completa expresadas en células de insectos. Para el ensayo de quinasa Aurora2, la fosforilación del péptido sustrato por la proteína Aurora2 recombinante se evalúa mediante un ensayo Z'-LYTE a ATP de 3 a 300 μM y varias concentraciones de PF-03814735 durante 60 minutos, a una concentración de péptido sustrato de 2 μM ( LRRWSLG biotinilado, × 4). La fosforilación es lineal durante este tiempo para todas las condiciones. Para el ensayo de quinasa Aurora1, la fosforilación del péptido sustrato por la proteína Aurora1 recombinante se evalúa mediante un ensayo de centelleo de proximidad en un formato de placa de 96 pocillos en el que se mide la incorporación de 33P en el sustrato peptídico (LRRWSLG biotinilado, × 4) mediante captura el péptido en una perla de ensayo de proximidad de centelleo de estreptavidina. Método Las líneas celulares se cultivan en medios apropiados y se evalúan después de 48 h de exposición a PF-03814735 o al vehículo, seguido de la determinación del número de células en un contador Coulter. La proliferación (medida por un aumento en el número de células) se expresa como porcentaje de controles no tratados. Para evaluar el tiempo de exposición de PF-03814735 requerido para la actividad antiproliferativa, los cultivos de células HL-60 se cultivan en medio RPMI suplementado con suero bovino fetal inactivado por calor al 15% y se exponen a diversas concentraciones de PF-03814735 para 4, 8, 12, 24, y 48 horas, seguido de una etapa de lavado e incubación con medio de crecimiento sin PF-03814735 durante el resto del período de ensayo de 72 horas. También se evalúa la exposición continua a PF-03814735 durante 72 horas. Los recuentos de células se determinan mediante un contador Coulter.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de la quinasa Aurora