.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 320,36 LY2811376 es el primer inhibidor de la β-secretasa no peptídica (BACE1) disponible por vía oral con IC50 de 239 nM-249 nM, que actúa para disminuir la secreción de Aβ con EC50 de 300 nM , demostró tener una selectividad de 10 veces hacia BACE1 sobre BACE2, y una inhibición de más de 50 veces sobre otras proteasas aspárticas que incluyen catepsina D, pepsina o renina. Fase 1. \ n LY2811376 demuestra una inhibición dependiente de la concentración de hBACE1 con una CI50 de 239 y 249 nM contra un péptido sintético pequeño o un sustrato proteico quimérico más grande, respectivamente. El tratamiento con LY2811376 produce una disminución dependiente de la concentración en la secreción de Aβ en células HEK293 que sobreexpresan APP. LY2811376 inhibe la secreción de Aβ con EC50 de ~ 100 nM en cultivos neuronales primarios de ratón transgénico PDAPP. La administración de LY2811376 (dosis de 10, 30 y 100 mg / kg) da como resultado reducciones significativas dependientes de la dosis en Aβ, así como en sAPPβ y C99, los productos de escisión proximal de la proteólisis de APP por BACE1 en el modelo de ratón APPV717F de patología de Aβ. Después del tratamiento con LY2811376 (5 mg / kg), se observan reducciones en Aβ1-x en plasma, con una reducción máxima del 85% observada de 4 a 12 h después de la dosificación en perros beagle. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [2]
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Determination of enzymatic efficiency
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The stock solution for each FRET peptide substrate is prepared at 30 mM in dimethylsulfoxide (DMSO). The huBACE1:Fc muBACE1:Fc preparation is concentrated through YM10 Centricon. to a final concentration of at least 7 mg/mL. The optimal enzyme concentration for each FRET peptide substrate is determined individually at 30μM FRET peptide substrate in 50 mM ammonium acetate, pH 4.6, 1 mg/mL BSA and 1 mM Triton X-100. The enzymatic efficiency (kcat /Km) of either of the BACE1 orthologs toward individual FRET peptide substrates at 15, 30 and 100μM is determined under the optimal conditions for each substrate. The progress of the reaction is monitored by measuring an increase of the emission signal at 420 nm with excitation wavelength set at 320 nm, using a GEMINI fluorescence plate reader. Amino acid conjugated aminobenzoate is used to convert the emission signal in the relative fluorescence units into the molar concentration of product generated in the reaction mixture. The initial phase of the timedependence curve is fitted with a linear function whose slope is used to calculate the initial rate for huBACE1:Fc toward each peptide substrate. The kcat /Km values are calculated from the linear dependence of the initial rate on the concentration of each peptide.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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APP-overexpressing HEK293.
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Concentrations
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~ 100 μM
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Incubation Time
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48–72 hours
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Method
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The cytotoxicity in the HEK293Swe cell model is assessed using a CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay.
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\ n Conversión de diferentes modelos de animales según BSA (valor basado en datos del borrador de directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
|
0.02
|
0.007
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Km factor
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20
|
20
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12
|
12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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320.36
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Formula
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C15H14F2N4S
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CAS No.
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1194044-20-6
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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16 mg/mL
(49.94 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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64 mg/mL
(199.77 mM)
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In vivo
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30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
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30 mg/mL
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Chemical Name
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(S)-4-(2,4-difluoro-5-(pyrimidin-5-yl)phenyl)-4-methyl-5,6-dihydro-4H-1,3-thiazin-2-amine
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : Señalización neuronal > Inhibidor de BACE
