PF-00562271 939791-38-5

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 665.66 PF-00562271 es la sal de bencenosulfonato de PF-562271, que es un inhibidor reversible potente, competitivo con ATP de FAK con IC50 de 1.5 nM, ~ 10- veces menos potente para Pyk2 que FAK y selectividad> 100 veces contra otras proteína quinasas, excepto para algunas CDK. Fase 1. \ n Actividad biológica PF-562271 muestra los efectos inhibidores selectivos sobre la actividad tirosina quinasa FAK y Pyk2 con IC50 de 1,5 nM y 14 nM, respectivamente. Y en los ensayos basados ​​en células, se muestra que la CI50 de PF-562271 es 5 nM para FAK, que es más selectiva en comparación con otras dianas de quinasas. En cultivos bidimensionales (2D), PF-562271 da como resultado una inhibición de la proliferación celular dependiente de la dosis en células FAK WT, FAK - / - y FAK quinasa deficiente (KD) con IC50 de 3,3 μM, 2,08 μM y 2,01 μM, respectivamente . En varios modelos de xenoinjerto sc humano, PF-562271 exhibe inhibición del crecimiento tumoral dependiente de la dosis y produce una inhibición tumoral máxima para PC-3M, BT474, BxPc3 y LoVo que varía de 78% a 94% de inhibición a dosis de 25 a 50 mg / kg dos veces al día, sin pérdida de peso, morbilidad ni muerte. PF-562271 (25 mg / kg por vía oral) conduce a una disminución significativa en la progresión del tumor en los modelos de xenoinjerto PC3M-luc-C6 de metástasis tanto subcutánea como ósea. En un modelo de xenoinjerto de carcinoma hepatocelular Huh7.5, la terapia de combinación de sunitinib y PF-562271 se dirige a la angiogénesis y la agresividad del tumor, y produce un efecto antitumoral más significativo que el agente único al bloquear el crecimiento del tumor y afectar la capacidad del tumor para recuperarse tras la retirada. de la terapia. \ n Ensayo de quinasa recombinante y cinética enzimática En resumen, el dominio de quinasa FAK activado purificado (aminoácido 410-689) se hace reaccionar con ATP 50 μM y 10 μg por pocillo de un polímero peptídico aleatorio de Glu y Tyr, p (Glu / Tyr) , en tampón quinasa [HEPES 50 mM (pH 7,5), NaCl 125 mM y MgCl2 48 mM] durante 15 minutos. La fosforilación de p (Glu / Tyr) se desafía con PF-562271 diluido en serie a concentraciones de 1/2-Log comenzando con una concentración máxima de 1 µM. Cada concentración se prueba por triplicado. La fosforilación de p (Glu / Tyr) se detecta con un anticuerpo antifosfotirosina general (PY20) seguido de anticuerpo IgG de cabra anti-ratón conjugado con peroxidasa de rábano picante (HRP). Se agrega el sustrato de HRP y se obtienen lecturas de absorbancia a 450 nm después de la adición de la solución de parada (H2SO4 2 M). Los valores de CI50 se determinan utilizando el modelo Hill-Slope. El perfil de selectividad de quinasa amplia se realiza internamente y mediante el servicio de detección de selectividad de KinaseProfiler disponible a través de UpState Biotechnology. Método Las células se siembran en placas durante 48 horas antes de la adición de PF-562271. Después de 3 días, las células se fijan mediante la adición de una solución de ácido tricloroacético (TCA) al 25% enfriada con hielo antes de teñir con la solución de colorante de sulforrodamina B (SRB). Las placas se lavan con ácido acético glacial al 1%, se secan al aire y se resuspenden en tampón Tris 10 mM, pH 10,5 antes de leer la absorbancia a 540 nm. El ajuste de la curva y la generación de valores de IC50 se llevan a cabo utilizando el software GraphPad Prism 4 a partir de seis réplicas.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de c-Met