Golvatinib (E7050) 928037-13-2

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 633.69 Golvatinib (E7050) es un inhibidor dual de c-Met y VEGFR-2 con IC50 de 14 nM y 16 nM, no inhibe el crecimiento de HUVEC estimulado por bFGF (hasta hasta 1000 nM). Fase 1/2. \ n Actividad biológica Los estudios in vitro indican que E7050 inhibe de forma potente la fosforilación de c-Met y VEGFR-2. E7050 también reprime de forma potente el crecimiento tanto de células tumorales amplificadas con c-met como de células endoteliales estimuladas con HGF o VEGF. E7050 evita la resistencia a todos los EGFR-TKI reversibles, irreversibles y mutantes selectivos inducidos por HGF exógeno y / o endógeno en líneas celulares de cáncer de pulmón EGFR mutantes, al bloquear la vía Met / Gab1 / PI3K / Akt in vitro. E7050 también previene la aparición de células HCC827 resistentes al gefitinib inducidas por la exposición continua a HGF. Los estudios in vivo que utilizan E7050 muestran inhibición de la fosforilación de c-Met y VEGFR-2 en tumores, y una fuerte inhibición del crecimiento tumoral y angiogénesis tumoral en modelos de xenoinjerto. El tratamiento de algunas líneas tumorales que contienen amplificaciones de c-met con dosis altas de E7050 (50-200 mg / kg) induce la regresión y desaparición del tumor. En un modelo de diseminación peritoneal, E7050 muestra un efecto antitumoral contra los tumores peritoneales, así como una prolongación significativa de la vida útil en los ratones tratados. En otra investigación de modelo de xenoinjerto, los tumores producidos por células Ma-1 transfectadas con HGF (Ma-1 / HGF) son más angiogénicos que los tumores de control de vectores y muestran resistencia a ZD1839. E7050 solo inhibe la angiogénesis y retarda el crecimiento de tumores Ma-1 / HGF. E7050 combinado con ZD1839 induce una marcada regresión del crecimiento tumoral. \ n Análisis de transferencia Western El estado de fosforilación de c-Met y VEGFR-2 se detecta mediante análisis de transferencia Western. Para c-Met, las células MKN45 se incuban con una dilución en serie de E7050 en medio completo a 37 ° C durante 2 h. Para VEGFR-2, las HUVEC se privan de medio sin suero endotelial humano que contiene FBS al 0,5% durante 24 h. Posteriormente, las HUVEC se incuban con una dilución en serie de E7050 durante 1 hy luego se incuban con 20 ng / ml de VEGF humano durante 5 min. Las células se lisan con tampón de lisis (HEPES 50 mM [pH 7,4], NaCl 150 mM, glicerol al 10%, Triton X-100 al 1%, MgCl2 1,5 mM, EDTA 1 mM [pH 8,0], NaF 100 mM, fluoruro de fenilmetilsulfonilo 1 mM Ortovanadato de sodio 1 mM, aprotinina 10 μg / mL, leupeptina 50 μg / mL y pepstatina A 1 μg / mL). Las muestras tumorales resecadas se homogeneizan con tampón de lisis que contiene β-glicerofosfato 25 mM y cóctel 2 de inhibidor de fosfatasa al 0,5% (v / v) a 4ºC. Los desechos celulares se eliminan mediante centrifugación a 17860 g durante 20 min a 4 ° C. Se someten alícuotas de los sobrenadantes que contienen 5-20 µg de proteína a SDS-PAGE en condiciones reductoras. A continuación, las proteínas se transfieren a membranas de PVDF, se bloquean con TBS que contiene Tween-20 al 0,05% y leche desnatada al 5% o BSA al 5%. Las membranas se sondaron con los siguientes anticuerpos: anticuerpo policlonal anti-c-Met (C-28) y anticuerpo policlonal anti-VEGFR-2 (C-20); clon 4G10 de anti-fosfotirosina de ratón; y anticuerpo policlonal anti-VEGFR-2, anticuerpo policlonal anti-fosfo-VEGFR-2 (Tyr996) y anticuerpo policlonal anti-fosfo-c-Met (Tyr1234 / 1235). La detección se realiza utilizando un kit de quimioluminiscencia mejorado Super Signal. Las bandas inmunorreactivas se visualizan por quimioluminiscencia con un sistema de detección Image Master-VDS-CL. La intensidad de cada banda se mide utilizando un analizador de imágenes. Método Se siembran células (1-3 × 103 células / 100 μL / pocillo) en placas de cultivo de 96 pocillos con diversas concentraciones de E7050 y se cultivan durante 3 días. Luego, se agregan 10 μL de reactivo WST-8 a cada pocillo y se mide la absorbancia a 450 nm en comparación con una medición de referencia a 660 nm utilizando un lector de microplacas MTP-500. HUVEC (2 × 103 células / pocillo) se cultivan durante 3 días en medio que contiene HGF (30 ng / ml), VEGF (20 ng / ml) o factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF) (20 ng / ml) junto con E7050 diluido.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de c-Met