.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; acolchado: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 371,3 PYR-41 es el primer inhibidor permeable a las células de la enzima activadora de ubiquitina E1, sin actividad en E2. \ n PYR-41 (50 μM) inhibe la actividad de ubiquitina -activación de la enzima E1 en más del 90%. PYR-41 podría ser un objetivo para el ataque nucleofílico y potencialmente reacciona con la cisteína del sitio activo de E1. PYR-41 bloquea eficazmente la degradación de ciclina E. PYR-41 disminuye el nivel de tioésteres de E1fUb en células con una CI50 de entre 10 y 25 μM y previene la acumulación de proteínas ubiquitiladas inducida por inhibidores del proteasoma. PYR-41 aumenta la sumoilación total en células y en células que albergan E1 sensible a la temperatura. PYR-41 es capaz de inhibir las actividades de ubiquitilación tanto dependientes del proteasoma como independientes del proteasoma. PYR-41 (50 μM) atenúa 1 ng / ml de activación del factor nuclear κB mediado por IL-1α en> 60% mediante la prevención de la ubiquitilación aguas abajo y la degradación proteasomal de IκBα. PYR-41 inhibe la degradación de p53 y activa la actividad transcripcional de p53, lo que permite su muerte diferencial a las células transformadas que expresan p53. PYR-41 bloquea las reacciones de ubiquitinación pero paradójicamente conduce a la acumulación de proteínas ubiquitinadas de alto MW. PYR-41 también tiene una actividad inhibidora igual o mayor contra varias deubiquitinasas (DUB) en células intactas y USP5 purificada in vitro. PYR-41 también media el entrecruzamiento de proteína quinasas específicas (Bcr-Abl, Jak2) para inhibir su actividad de señalización. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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ubiquitylation reaction assay
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Rabbit or mouse E1 (~250 ng) is incubated with 32P-ubiquitin in 1 eaction buffer [50 mM Tris (pH 7.4), 0.2 mM ATP, 0.5 mM MgCl2] at room temperature for 15 min. In some experiments, the His-tagged mouse E1 is bound to TALON cobalt affinity resin before carrying out incubations and reactions. Mouse E1 and 32P-ubiquitin are added to the beads in 1 ?reactionbuffer and incubated as for E1 reactions. Samples are heated in nonreducing SDS-PAGE sample buffer and resolved by SDS-PAGE. Thioesters with ubiquitin are visualized by Storm PhosphoImager.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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\ n Información química
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Molecular Weight (MW)
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371.3
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Formula
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C17H13N3O7
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CAS No.
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418805-02-4
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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74 mg/mL
(199.29 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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Chemical Name
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Benzoic acid, 4-[4-[(5-nitro-2-furanyl)methylene]-3,5-dioxo-1-pyrazolidinyl]-, ethyl ester
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orte
Grupos de Producto : Ubiquitina > Inhibidor de activación E1
