BGJ398 (NVP ‑ BGJ398) 872511-34-7

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 560.48 BGJ398 (NVP-BGJ398) es un inhibidor de FGFR potente y selectivo para FGFR1 / 2/3 con IC50 de 0.9 nM / 1.4 nM / 1 nM,> 40- veces selectivo para FGFR frente a FGFR4 y VEGFR2, y poca actividad para Abl, Fyn, Kit, Lck, Lyn y Yes. Fase 2. \ n Actividad biológica BGJ398 también previene VEGFR2 con baja potencia. La CI50 de BGJ398 para inhibir VEGFR2 es 0,18 μM. BGJ398 suprime otras quinasas, incluidas ABL, FYN, KIT, LCK, LYN y YES con IC50 de 2,3 μM, 1,9 μM, 0,75 μM, 2,5 μM, 0,3 μM y 1,1 μM, respectivamente. A nivel celular, BGJ398 inhibe la proliferación de las células BaF3 dependientes de FGFR1, FGFR2-Q y FGFR3 con IC50 de 2,9 µM, 2,0 µM y 2 µM, respectivamente. BGJ398 interfiere con la autofosforilación en residuos de tirosina específicos, incluidos FGFR-WT, FGFR2-WT, FGFR3-K650E, FGFR3-S249C y FGFR4-WT con IC50 de 4,6 nM, 4,9 nM, 5 nM, 5 nM y 168 nM, respectivamente. BGJ398 suprime la proliferación de las células cancerosas con sobreexpresión de FGFR3 de tipo salvaje (WT) como RT112, RT4, SW780 y JMSU1 con IC50 de 5 nM, 30 nM, 32 nM y 15 nM, respectivamente. En este modelo de cáncer de vejiga con xenoinjerto ortotópico, BGJ398 induce la inhibición del crecimiento tumoral y la estasis después de la administración oral durante 12 días consecutivos a las dosis de 10 y 30 mg / kg, respectivamente. Curiosamente, los animales que recibieron BGJ398 no muestran pérdida de peso corporal (10 mg / kg) o aumentan un 10% de peso corporal (30 mg / kg), una indicación adicional de eficacia. Las ratas Rowett hembras y portadoras de tumores RT112 reciben una única administración oral de la sal monofosfato de BGJ398 a las dosis de 4,25 y 8,51 mg / kg. BGJ398 reduce significativamente los niveles de pFRS2 y pMAPK de una manera dependiente de la dosis. BGJ398 inhibe significativamente la angiogénesis estimulada por bFGF de una manera dependiente de la dosis. Sin embargo, BGJ398 no altera la formación de vasos sanguíneos inducida por VEGF. \ n Ensayo radiométrico de quinasa La actividad de quinasa enzimática se evalúa midiendo la fosforilación de un sustrato sintético mediante el dominio de quinasa FGFR3-K650E de fusión GST purificado, en presencia de ATP radiomarcado. Las actividades enzimáticas se miden mezclando 10 µl de una solución o control de BGJ398 concentrado 3 veces con 10 µl de la mezcla de sustrato correspondiente (sustrato peptídico, ATP y [γ33P] ATP). Las reacciones se inician mediante la adición de 10 µl de una solución concentrada 3 veces de la enzima en el tampón de ensayo. Las concentraciones finales de los componentes del ensayo son las siguientes: 10 ng de GST-FGFR3-K650E, Tris-HCl 20 mM, pH 7,5, MnCl2 3 mM, MgCl2 3 mM, DTT 1 mM, 250 μg / mL PEG 20000, 2 μg / ml de poli (EY) 4: 1, DMSO al 1% y ATP 0,5 µM (γ- [33P] -ATP 0,1 µCi). El ensayo se lleva a cabo según el método de unión al filtro (FB) en placas de 96 pocillos a temperatura ambiente durante 10 minutos en un volumen final de 30 μL incluyendo BGJ398. Las reacciones enzimáticas se detienen mediante la adición de 20 μL de EDTA 125 mM, y la incorporación de 33P en los sustratos polipeptídicos se cuantifica de la siguiente manera: 30 μL de la mezcla de reacción detenida se transfieren a membranas Immobilon-PVDF previamente empapadas durante 5 minutos con metanol, se enjuagó con agua, se remojó durante 5 min con H3PO4 al 0,5% y se montó en un colector de vacío con la fuente de vacío desconectada. Después de las manchas, se conecta el vacío y cada pocillo se enjuaga con H3PO4 al 0,5% (200 μL). Las membranas libres se retiran y se lavan cuatro veces en un agitador con H3PO4 al 1% y una vez con etanol. Las membranas se secan y se recubren con la adición de 10 μL / pocillo de un fluido de centelleo. Las placas se sellan finalmente y se cuentan en un contador de centelleo de microplacas. Los valores de CI50 se calculan mediante análisis de regresión lineal del porcentaje de inhibición del BGJ398. \ n Método Las líneas celulares murinas BaF3, cuya proliferación y supervivencia se ha vuelto independiente de IL-3 mediante transducción estable con tirosina quinasas activadas por mutación o fusión con un compañero dimerizante, se cultivan en medio RPMI-1640 suplementado con FBS al 10%, 4,5 g / L de glucosa, 1,5 g / L de bicarbonato de sodio y Pen / Strep. Las células se pasan dos veces por semana. La inhibición mediada por BGJ398 de la proliferación y viabilidad de células BaF3 se evalúa usando un ensayo bioluminiscente de luciferasa. Se siembran células BaF3 o BaF3 Tel-TK de crecimiento exponencial en placas de 384 pocillos (4250 células / pocillo) a 50 μL / pocillo utilizando un dispensador de líquido μFill en medio fresco. BGJ398 se diluye en serie en DMSO y se coloca en una placa de polipropileno de 384 pocillos. Luego, se transfieren 50 nL de BGJ398 a las placas que contienen las células utilizando el dispositivo de transferencia de pintool, y las placas se incuban a 37ºC (5% de CO2) durante 48 horas. Luego se agregan 25 μL de Bright-Glo y se cuantifica la luminiscencia usando un Analyst-GT. El software de ajuste de curvas personalizado se utiliza para producir un ajuste logístico del porcentaje de viabilidad celular en función del logaritmo de la concentración de inhibidor. El valor de CI50 se determina como la concentración de BGJ398 necesaria para reducir la viabilidad celular al 50% de un control de DMSO.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de FGFR