Semagacestato (LY450139) 425386-60-3

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 361.44 Semagacestat (LY450139) es un bloqueador de γ-secretasa para Aβ42, Aβ40 y Aβ38 con IC50 de 10,9 nM, 12,1 nM y 12,0 nM, también inhibe la señalización de Notch con IC50 de 14,1 nM. Fase 3. \ n Actividad biológica Semagacestat reduce la secreción de Aβ42, Aβ40 y Aβ38 de células de glioma humano H4 que sobreexpresan de manera estable la APP humana de tipo salvaje en el medio de cultivo, con IC50 de 10,9 nM, 12,1 nM y 12,0 nM, respectivamente, sin afectar viabilidad celular. El semagacestat también aumenta el β-CTF en los lisados ​​celulares con una ECmax de 16,0 nM, y el aumento puede atenuarse inesperadamente a concentraciones elevadas. Semagacestat inhibe la señalización de Notch con IC50 de 14,1 nM y muestra una selectividad mínima para evitar Notch con Notch IC50 / Aβ42 IC50 de solo 1,3. El semagacestat causa una disminución dependiente de la concentración en Aβ40 secretado en el medio con IC50 de 111 nM de CTX murino que expresa APP murina endógena, pero la formación de Aβ42 murino en CTX es aproximadamente 12 veces menor que Aβ40 de acuerdo con los datos de neuronas de ratones de tipo salvaje . La administración oral de Semagacestat (1 mg / kg) a ratones Tg2576 transgénicos con APP de 5,5 meses de edad mejora significativamente los déficits de memoria en la memoria de trabajo espacial utilizando la tarea Y-maze, que desaparece después de 8 días de dosificación subcrónica. LY450139 disminuye los niveles de hipocampo de Aβ42 y Aβ40 a 10 mg / kg (reducción del 22-23%) y 30 mg / kg (reducción del 36-41%) y aumenta el β-CTF a 0.3-10 mg / kg de manera dependiente de la dosis sin inhibición en el procesamiento de otros sustratos de la γ-secretasa, como Notch, N-cadherina o EphA4, en el cerebro, pero altera la cognición normal en ratones de tipo salvaje y ratones Tg2576 de 3 meses de edad que no logran restaurar los déficits cognitivos en la prueba del laberinto en Y. \ n Ensayo de procesamiento de APP celular y ensayo de señalización de Notch Se tratan células de glioma humano H4 que sobreexpresan de forma estable la APP695 humana de tipo salvaje con Semagacestat a diversas concentraciones durante 24 horas. Los niveles de Aβ42, Aβ40 y Aβ38 en los medios se miden usando kits de ELISA separados. El vector de expresión de la forma constitutivamente activa de Notch (NotchΔE), que codifica las bases 1-60 y 5193-6657 de la región codificante de Notch1 humana (NM_017617), se construye en un vector pcDNA3.1 con una modificación de secuencia de ratón a humano. La actividad de señalización de Notch se evalúa usando el kit de ensayo Cignal RBP-Jk Reporter Assay. La proteína RBP-Jk [CSL / CBF1 / Su (H) / Lag1] es un factor de transcripción activado con el dominio intracelular Notch producido por la γ-secretasa. Las células H4 se transfectan transitoriamente con el vector de expresión NotchΔE humano y la construcción de luciferasa que responde a RBP-Jk usando Lipofectamine 2000, y luego se exponen a diversas concentraciones de Semagacestat durante 16 horas. La señalización de Notch se mide basándose en la actividad de luciferasa en el lisado celular usando el sistema de ensayo de luciferasa Dual-Glo. \ n Método Las células se incuban con Semagacestat durante 24 horas. Para la detección de la viabilidad celular, el porcentaje de células viables se cuantifica por su capacidad para reducir el bromuro de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil tetrazolio (MTT) después de la incubación con 0,5 mg / ml de MTT. durante 60 minutos. Para la detección de especies de sAPP, las células se lisan y analizan mediante transferencia Western.

Grupos de Producto : Proteasas > Inhibidor de gamma-secretasa