LAQ824 (Dacinostat) 404951-53-7

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 379.459 LAQ824 (Dacinostat) es un nuevo inhibidor de HDAC con IC50 de 32 nM y se sabe que activa el promotor p21. \ n \ n Actividad biológica LAQ824 activa la expresión de el gen que codifica el inhibidor del ciclo celular p21 activando el promotor p21 con el 50% de la activación máxima del promotor (AC50) de 0,30 µM. LAQ824 inhibe el crecimiento celular tanto de H1299, una línea de carcinoma de pulmón de células no pequeñas, como de HCT116, una línea de células de cáncer de colon con IC50 de 0,15 μM y 0,01 μM, respectivamente, y el efecto antiproliferativo de LAQ824 es selectivo hacia las líneas de células tumorales mientras que sólo induce la detención del crecimiento en fibroblastos normales. Además, LAQ824 induce un aumento dependiente de la dosis de la proteína p21 en las células A549 y un aumento del estado hipofosforilado del supresor de tumores Rb. Un estudio reciente muestra que LAQ824 induce cambios de cromatina a nivel del promotor del gen IL-10 que conducen a un mayor reclutamiento de los represores transcripcionales HDAC11 y PU.1 e inhibe la producción de IL-10 en macrófagos murinos BALB / c. En HCT116 y xenoinjertos de tumores de colon humano en ratones desnudos, el tratamiento con LAQ824 a 100 mg / kg produce los efectos inhibidores sobre el crecimiento tumoral en un modo dependiente de la dosis sin citotoxicidad general. \ n Ensayo de histona desacetilasa in vitro Las enzimas HDAC se purifican parcialmente a partir del lisado de células H1299 mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando la columna Q Sepharose Fast Flow. Los complejos enzimáticos se recogen de 500 mg de lisado celular total mediante inmunoprecipitación con anticuerpo policlonal cdk2 o anticuerpo monoclonal cdk1 / cdc2. Los inmunoprecipitados se resuspenden en tampón quinasa (Hepes 50 mM, pH 8, MgCl2 10 mM, EDTA 2,5 mM, ditiotreitol 1 mM, ATP 20 mM, β-glicerofosfato 10 mM, NaVO4 0,1 mM, fluoruro de sodio 1 mM, ATP 50 mM, 10 μCi de [γ-32P] ATP) junto con 1 μg de sustrato de proteína recombinante pRb (cdk2) o 10 ml de mezcla de histonas H1 que contienen 20 μg de sustrato (cdc2). Las histonas Rb y H1 fosforiladas se resuelven mediante electroforesis y se cuantifican utilizando un PhosphorImager. \ n Método La proliferación celular se mide utilizando una adaptación de los procedimientos publicados (ensayo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -5- (3-carboximetoxifenil) -2- (4-sulfonil) -2H-tetrazolio ). Las células se siembran en placas de 12 pocillos y se cultivan en RPMI 1640 que contiene FBS al 10%. Las células se cultivan en presencia de diversas concentraciones de TSA (hasta 1.000 ng / ml). Para examinar la inhibición del crecimiento por TSA, se determinan los números de células viables mediante exclusión de colorante azul tripán, contados en un hemocitómetro tipo Nesbauer durante 0 horas, 24 horas y 48 horas. Se añade la misma cantidad de etanol al medio RPMI 1640 que en el experimento de control. Todos los experimentos se realizan por duplicado y se repiten 3 veces. El valor de fondo medio (tratamiento con medio solo) se resta de cada pocillo experimental; Los valores por triplicado se promedian para cada dilución de compuesto. Las siguientes fórmulas se utilizan para calcular el porcentaje de crecimiento: Si X0,% de crecimiento = (X-T0) / T0 * 100; Si X> T0,% de crecimiento = (X-T0) / (GC-T0) * 100. donde T0 es el valor promedio de T0 - fondo, GC es el valor promedio de células no tratadas (por triplicado) - fondo, y X es el valor promedio de células tratadas con compuesto (por triplicado) - fondo. El [% de crecimiento "se representa frente a la concentración de compuesto y se usa para calcular la CI50 usando técnicas de regresión lineal entre puntos de datos para predecir la concentración de compuestos al 50% de inhibición.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de HDAC