Nexturastat A 1403783-31-2

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 341.4 Nexturastat A es un inhibidor de HDAC6 potente y selectivo con IC50 de 5 nM, selectividad> 190 veces superior a otras HDAC. \ n \ n Actividad biológica En las células de melanoma murino B16, Nexturastat A conduce a un aumento dependiente de la dosis de los niveles de acetil α-tubulina sin una elevación concomitante de la acetilación de la histona H3. Además, Nexturastat A inhibe de forma potente el crecimiento de células de melanoma B16 con GI50 de 14,3 μM. Ensayos de inhibición de HDAC Los ensayos de inhibición de HDAC son realizados por Reaction Biology Corp. usando HDAC1 y -6 de longitud completa recombinantes humanos aislados de un sistema de expresión de baculovirus en células Sf9. Se usa como sustrato un péptido fluorogénico acetilado, RHKKAc, derivado de los residuos 379-382 de p53. El tampón de reacción está compuesto por Tris-HCl 50 mM pH 8,0, NaCl 127 mM, KCl 2,7 mM, MgCl2 1 mM, BSA 1 mg / ml y una concentración final de DMSO al 1%. Los compuestos se administran en DMSO y se administran a la mezcla de enzimas con una preincubación de 5 a 10 min seguido de la adición de sustrato y la incubación durante 2 ha 30ºC. Se añaden tricostatina A y revelador para apagar la reacción y generar fluorescencia, respectivamente. Las curvas de respuesta a la dosis se generan a partir de un compuesto de 30 µM con diluciones seriadas de tres veces para generar un gráfico de 10 dosis. A continuación, se generan valores de CI50 a partir de los gráficos resultantes, y los valores expresados ​​son el promedio de ensayos duplicados ± desviación estándar. \ n Método B16 Se siembran células de melanoma murino a 5000 / pocillo en placas de fondo plano de 96 pocillos. Al día siguiente, se cambia el medio por uno que contiene diversas concentraciones de HDACi o concentraciones de vehículo de DMSO equiparadas diluidas en medio completo por triplicado. Las células se incuban durante 48 horas a 37 ° C y 5% de CO2. La densidad de las células viables y metabólicamente activas se cuantifica utilizando un ensayo MTS estándar según las instrucciones del fabricante. Brevemente, se agregan 20μL de reactivo por pocillo y se incuban a 37 ° C durante 3 horas. Las absorbancias a 490 nM se miden espectrofotométricamente con sustracción de fondo a 690 nM. A continuación, todos los valores se normalizan y se expresan como porcentaje del control medio (100%).
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Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de HDAC