Neratinib (HKI-272) 698387-09-6

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 557.04 Neratinib (HKI-272) es un inhibidor de HER2 y EGFR altamente selectivo con IC50 de 59 nM y 92 nM; inhibe débilmente KDR y Src, sin inhibición significativa de Akt, CDK1 / 2/4, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf y c-Met. Fase 3. \ n Actividad biológica Neratinib inhibe débilmente las tirosina quinasas KDR y Src con IC50 de 0,8 μM y 1,4 μM, respectivamente, siendo 14 y 24 veces menos activo en comparación con HER2. Neratinib no muestra actividad contra otras serina-treonina quinasas como Akt, ciclina D1 / cdk4, ciclina E / cdk2, ciclina B1 / cdk1, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf y Tpl-2, también como la tirosina quinasa c-Met. Neratinib inhibe selectivamente la proliferación de células 3T3 transfectadas con HER2 (3T3 / neu), así como otras dos células SK-Br-3 y BT474 que sobreexpresan HER-2 con valores de IC50 de 2-3 nM, mostrando> 230 veces potencia en comparación con las células 3T3 no transfectadas, así como con MDA-MB-435 y SW620 que son negativas para EGFR y HER2. Neratinib también inhibe la proliferación de células A431 dependientes de EGFR con una CI50 de 81 nM. Neratinib reduce la autofosforilación del receptor HER2 en células BT474 con una CI50 de 5 nM y la fosforilación de EGFR dependiente de EGF en células A431 con una CI50 de 3 nM. El bloqueo de HER-2 por Neratinib da como resultado la inhibición de las vías MAPK y Akt aguas abajo con IC50 de 2 nM, más potente que Trastuzumab. Neratinib inhibe la expresión de ciclina D1 y la fosforilación de la producción del gen de susceptibilidad a Rb en ​​células BT474 con IC50 de 9 nM, lo que conduce a la detención de G1-S y, en última instancia, a una disminución de la proliferación celular. La administración oral de neratinib inhibe significativamente el crecimiento de xenoinjertos de 3T3 / neu, con una inhibición del 34%, 53%, 98% y 98% a dosis de 10, 20, 40 y 80 mg / kg / día, respectivamente. De acuerdo con la inhibición de la fosforilación de HER-2 en un 84% dentro de 1 hora de la administración a 40 mg / kg / día, Neratinib inhibe el crecimiento de xenoinjertos BT474 en un 70-82%, 67% y 93% a dosis de 5, 10 y 40 mg / kg / día, respectivamente. Neratinib también es eficaz contra xenoinjertos de SK-OV-3 con una inhibición del 31% y 85% a 5 y 60 mg / kg / día, respectivamente. Neratinib es menos potente contra los xenoinjertos de A431 dependientes de EGFR que los tumores dependientes de HER-2, con una inhibición del 32% y 44% a 5 y 20 mg / kg / día, respectivamente. Neratinib muestra poca actividad contra xenoinjertos MCF-7 y MX-1 que expresan niveles bajos de HER-2 y EGFR, con solo un 28% de inhibición a 80 mg / kg / día, lo que sugiere que Neratinib tiene actividad selectiva para las células que expresan HER-2 o EGFR . \ n Ensayo de autofosforilación sin células utilizando fluorometría de resolución temporal. Neratinib se prepara como reservas de 10 mg / ml en DMSO y se diluye en HEPES 25 mM (pH 7,5; 0,002 ng / ml-20 μg / ml). Los fragmentos COOH-terminales recombinantes purificados de HER2 (aminoácidos 676-1255) o el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) (aminoácidos 645-1186) [diluidos en HEPES 100 mM (pH 7,5) y glicerol al 50%] se incuban con concentraciones crecientes de neratinib en HEPES 4 mM (pH 7,5), MnCl2 0,4 mM, vanadato de sodio 20 mM y DTT 0,2 mM durante 15 minutos a temperatura ambiente en placas ELISA de 96 pocillos. La reacción de la quinasa se inicia mediante la adición de ATP 40 µM y MgCl2 20 mM y se deja continuar durante 1 hora a temperatura ambiente. Se lavan las placas y se detecta la fosforilación usando anticuerpos anti-fosfotirosina marcados con europio (15 ng / pocillo). Después de los pasos de lavado y mejora, la señal se detecta usando un lector de fluorescencia Victor2 (longitud de onda de excitación 340 nm, longitud de onda de emisión 615 nm). La concentración de neratinib que inhibe la fosforilación del receptor en un 50% (IC50) se calcula a partir de las curvas de inhibición. Método Las células se exponen a diversas concentraciones de neratinib durante 2 o 6 días. La proliferación celular se determina usando sulforrodamina B, un colorante de unión a proteínas. Brevemente, las células se fijan con ácido tricloroacético al 10% y se lavan extensamente con agua. A continuación, las células se tiñen con sulforrodamina B al 0,1% y se lavan en ácido acético al 5%. El colorante asociado a proteínas se solubiliza en Tris 10 mM y la absorbancia se mide a 450 nM. La concentración de neratinib que inhibe la proliferación celular en un 50% (IC50) se determina a partir de las curvas de inhibición.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de HER2