MG149 1243583-85-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 340,46 MG149 es un potente inhibidor de histona acetiltransferasa con IC50 de 74 μM y 47 μM para Tip60 y MOF, respectivamente. \ n \ n Actividad biológica MG149 se dirige al sitio de unión de acetil-CoA e inhibe la actividad acetiltransferasa del extracto nuclear de muestras de tejido de diferentes regiones del cerebro en ratones. MG149 también inhibe las vías p53 y NF-κB. \ n Ensayos de inhibición bioquímica Los ensayos de acetiltransferasa marcada con radioisótopos se llevan a cabo a 30ºC en un volumen de reacción de 30 µl. El tampón de reacción contenía HEPES 50 mM a pH 8,0, EDTA 0,1 mM, 50 µg / ml de BSA, ditiotreitol 1 mM, Triton-X100 al 0,1% y DMSO al 2%. Ac-CoA marcado con 14C se utiliza como donante de acetilo. El péptido que contiene la secuencia de 20 aminoácidos N-terminal de la histona H4 se usa como sustrato para p300 y Tip60, y el péptido que contiene la secuencia de 20 aminoácidos N-terminal de la histona H3 se usa como sustrato para PCAF. La reacción HAT se inicia con la enzima HAT después de que los otros componentes (Ac-CoA, sustrato peptídico y el inhibidor) se equilibran a 30 ° C durante 5 min. Las mediciones de la tasa se basaron en las condiciones iniciales (generalmente menos del 15% de consumo del sustrato limitante). Después de la reacción, la mezcla se carga en un papel de filtro Waterman P81 y luego se lava con bicarbonato de sodio 50 mM (pH 9,0) tres veces. El papel se seca al aire y la cantidad de radiactividad incorporada en el sustrato peptídico se cuantifica mediante recuento de centelleo líquido. En todos los casos, la acetilación de fondo (en ausencia de enzima) se resta de las señales totales. La CI50 se determina como la concentración de un inhibidor a la que se inhibe la mitad de la actividad enzimática. Para la determinación de la CI50, se prueba un rango de al menos siete concentraciones de inhibidor variadas al menos 20 veces alrededor de la CI50. Todos los ensayos se realizaron al menos dos veces, y los duplicados coincidieron en general en un 20%. Las condiciones para la medición de IC50 son; para el ensayo Tip60, la reacción contenía Tip60 10 nM, Ac-CoA 1 µM, H4-20 100 µM y el tiempo de reacción es 7 min, para el ensayo PCAF, la reacción contenía PCAF 1 nM, Ac-CoA 1 µM, 100 µM de H3-20 y el tiempo de reacción es de 3,5 min, para el ensayo de p300, la reacción contiene 5 nM de p300, 1 µM de Ac-CoA, 100 µM de H4-20 y el tiempo de reacción es de 5 min, para el ensayo de MOF, la reacción contiene MOF 1 nM, Ac-CoA 1 µM, H4-20 100 µM y el tiempo de reacción es de 5 min.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de histona acetiltransferasa