MM-102 1417329-24-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 669,8 MM-102 es un inhibidor de MLL1 peptidomimético de alta afinidad con IC50 de 0,4 μM. \ n Ensayo in vitro de histona metiltransferasa (HMT) El ensayo HMT se realiza en 50 HEPES mM pH 7,8, NaCl 100 mM, EDTA 1,0 mM y glicerol al 5% a 22ºC. Cada reacción contiene 1,5 μCi del cofactor, 3H-S-adenosilmetionina. El péptido H3 de 10 residuos se usa como sustrato a 50 µM. Los compuestos se añaden a concentraciones que oscilan entre 0,125 y 128 μM y se incuban con el complejo WDR5 / RbBP5 / ASH2L preensamblado a una concentración final de 0,5 μM para cada proteína durante 2-5 min. Las reacciones se inician mediante la adición de la proteína MLL1 a una concentración final de 0,5 µM y se dejan transcurrir durante 30 min antes de preparar el recuento de centelleo. Para contar las muestras, las reacciones se colocan en cuadrados separados de papel de filtro P81 y se precipitan sumergiéndolas en tampón de bicarbonato de sodio 50 mM recién preparado con pH 9,0. Después de lavar y secar, las muestras se agitan en vórtex en fluido de centelleo Ultima Gold y se cuentan. Como control negativo, los ensayos se realizan utilizando el complejo MLL1 / WDR5 / RbBP5 / ASH2L 0,5 μM ensamblado con el mutante que no interactúa, WDR5D107A. Método \ n Se cultivan células MV4; 11, KOPN8 y K562 en medio RPMI 1640 (ATCC) suplementado con suero bovino fetal al 10% y 100 U / L de penicilina-estreptomicina y se incuban a 37 ° C bajo 5% de CO2. Las células se siembran en placas de 12 pocillos para suspensión a una densidad de 5 x 105 por pocillo (1 ml) y se tratan con control de vehículo (DMSO, 0,2%) o MM-102 durante 7 días. El medio se cambia cada 2 días y se reabastecen los compuestos. El kit de ensayo de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo se utiliza siguiendo las instrucciones del fabricante. Primero, se agregan 100 μl del reactivo de ensayo en cada pocillo y el contenido se mezcla durante 2 min en un agitador orbital para inducir la lisis celular. Después de 10 min de incubación a temperatura ambiente, se lee la luminiscencia en un lector de microplacas.
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Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de histona metiltransferasa