EPZ005687 1396772-26-1

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 539.67 EPZ005687 es un inhibidor potente y selectivo de EZH2 con Ki de 24 nM, 50 veces más selectividad contra EZH1 y 500 veces más selectiva contra otras 15 proteínas metiltransferasas. \ n Actividad biológica EPZ005687 muestra una inhibición dependiente de la concentración de la actividad enzimática de PRC2 con un valor de CI50 de 54 nM. Es un inhibidor directo de la actividad enzimática de PRC2 y no funciona interrumpiendo las interacciones proteína-proteína entre las subunidades de PRC2. EPZ005687 se une en el bolsillo SAM del dominio EZH2 SET y es un inhibidor competitivo de SAM de la actividad de la enzima EZH2. La afinidad de EPZ005687 es similar (dentro de un rango doble) para los complejos PRC2 que contienen EZH2 de tipo salvaje y mutante Tyr641, pero una afinidad significativamente mayor por la enzima mutante A677G (5,4 veces). EPZ005687 reduce la metilación de H3K27 en varias células de linfoma. Muestra una muerte celular robusta en células mutantes heterocigotas Tyr641 o Ala677, con efectos mínimos sobre la proliferación de células de tipo salvaje. EPZ005687 aumenta la fase G1 del ciclo celular con disminuciones correlativas en las fases S y G2 / M. En una línea celular de linfoma mutante Tyr641, EPZ005687 puede conducir a la desrepresión de genes diana EZH2 conocidos y afectar genes específicamente reprimidos por el mutante EZH2 Tyr641. Ensayos enzimáticos bioquímicos El compuesto se incuba durante 30 min con 40 μL por pocillo de PRC2 5 nM (la concentración final del ensayo en 50 μL es 4 nM) en tampón de ensayo 1X (Bicina 20 mM [pH 7,6], Tween-20 al 0,002%, 0,005% Gelatina de piel bovina y DTT 0,5 mM). Se añaden 10 μL por pocillo de mezcla de sustrato que comprende tampón de ensayo 3 H-SAM, SAM sin marcar y péptido que representa los residuos de histona H3 21-44 que contienen biotina C-terminal (adjunta a una lisina cubierta con amida C-terminal) para iniciar la reacción (ambos sustratos están presentes en la mezcla de reacción final en sus respectivos valores de Km, un formato de ensayo denominado `` condiciones equilibradas ''. Las concentraciones finales de sustratos y el estado de metilación del péptido del sustrato se indican para cada enzima Las reacciones se incuban durante 90 min a temperatura ambiente y se inactivó con 10 μL por pocillo de 600 μM de SAM sin marcar, luego se transfirió a una placa flash de 384 pocillos y se lavó después de 30 min. Método Las densidades de siembra se determinan para cada línea celular sobre la base del crecimiento lineal en fase logarítmica Las células se cuentan y se vuelven a dividir a la densidad de placa original en medio fresco con EPZ005687 los días 4 y 7.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de histona metiltransferasa