EPZ-6438 1403254-99-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 572,74 EPZ-6438 es un inhibidor de EZH2 potente y selectivo con Ki e IC50 de 2,5 nM y 11 nM, que muestra una selectividad de 35 veces en comparación con EZH1 y> 4500 veces la selectividad con respecto a otros 14 HMT. \ n Actividad biológica La concentración de EPZ-6438 reduce de manera dependiente los niveles globales de H3K27Me3 en células de tipo salvaje o mutantes SMARCB1 e induce fuertes efectos antiproliferativos con IC50 que van de 32 nM a 1000 nM en MRT con eliminación de SMARCB1 líneas celulares. EPZ-6438 induce la expresión génica de la diferenciación neuronal y la inhibición del ciclo celular, mientras que inhibe la expresión de los genes de la vía Hedgehog, MYC y EZH2. El efecto antiproliferativo de EPZ-6438 se potencia con prednisolona o dexametasona en varias líneas celulares de linfoma mutante EZH2. En ratones SCID que portan xenoinjertos sc G401, EPZ-6438 induce estasis tumoral durante el período de administración y produce un retraso significativo en el crecimiento tumoral con un efecto mínimo sobre el peso corporal. Métodos bioquímicos EPZ-6438 se incuba durante 30 min con 40 μL por pocillo de PRC2 5 nM (la concentración final del ensayo en 50 μL es 4 nM) en tampón de ensayo 1X (Bicina 20 mM [pH 7,6], Tween-20 al 0,002%, 0,005 % De gelatina de piel bovina y DTT 0,5 mM). Se añaden 10 μL por pocillo de mezcla de sustrato que comprende tampón de ensayo 3 H-SAM, SAM sin marcar y péptido que representa los residuos de histona H3 21-44 que contienen biotina C-terminal (adjunta a una lisina cubierta con amida C-terminal) para iniciar la reacción (Ambos sustratos están presentes en la mezcla de reacción final en sus respectivos valores de Km, un formato de ensayo denominado `` condiciones equilibradas ''. Las concentraciones finales de sustratos y el estado de metilación del péptido del sustrato se indican para cada enzima Las reacciones se incuban durante 90 min a temperatura ambiente y se inactivó con 10 μL por pocillo de 600 μM SAM sin marcar, luego se transfirió a una placa flash de 384 pocillos y se lavó después de 30 min. sobre las curvas de crecimiento (medidas por el contenido de ATP) y la densidad durante un período de tiempo de 7 días. El día anterior al tratamiento con el compuesto, las células se siembran en placas de 96 pocillos por triplicado (para el período de tiempo de 0 a 7 días) o placas de 6 pocillos (para volver a sembrar el día 7 durante el resto del transcurso de tiempo). El día 0, las células no se tratan, se tratan con DMSO o se tratan con EPZ-6438 comenzando a 10 µM y disminuyendo en diluciones triples o cuádruples. Las placas se leen el día 0, el día 4 y el día 7 usando Cell Titer Glo, y el compuesto / medio se repone el día 4. El día 7, las placas de seis pocillos se tripsinizan, centrifugan y resuspenden en medio fresco para el recuento por Vi-Cell. Las células de cada tratamiento se vuelven a sembrar a la densidad original en placas de 96 pocillos por triplicado. Se deja que las células se adhieran a la placa durante la noche y las células se tratan como en el día 0. Los días 7, 11 y 14, las placas se leen usando Cell Titer Glo, y se repone el compuesto / medio el día 11. Los promedios de triplicados son utilizado para trazar la proliferación en el transcurso del tiempo y calcular los valores de CI50. Para el ciclo celular y la apoptosis, las células G401 y RD se siembran en placas de 15 cm por duplicado a una densidad de 1 x 106 células por placa. Las células se incuban con EPZ-6438 a 1 µM, en un total de 25 ml, durante un transcurso de 14 d, y las células se vuelven a dividir a la densidad de placa original los días 4, 7 y 11. El análisis del ciclo celular y el ensayo TUNEL son realizado utilizando un citómetro de flujo de Guayaba, siguiendo el protocolo del fabricante.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de histona metiltransferasa