BRD4770 1374601-40-7

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Actividad biológica La actividad bioquímica de los fluoroinmunoensayos de lantánidos mejorados por disociación de G9a (DELFIA) se realizan en placas blancas opacas de 384 pocillos recubiertas con neutravidina. Los compuestos de prueba se diluyen a 12 µg / ml en Tris-HCl 50 mM pH 8,5 que contiene DMSO al 4% y se dispensan 10 µl en los pocillos. Los pocillos de control y blanco recibieron sólo tampón compuesto. Se diluyen GST-G9a a 10 µg / ml y SAM a 40 µM en Tris HCl 50 mM pH 8,5 / DTT 10 mM y se añaden en un volumen de 20 µL. Los pocillos en blanco reciben únicamente tampón Tris / DTT. Las reacciones se inician mediante la adición de sustrato de cisbiotina H3 (1-20) 800 nM en Tris 50 mM pH 8,5 en un volumen de 10 µl, y se incuban a temperatura ambiente durante 60 minutos. Las placas se lavan 3 veces con 100 μl de tampón de lavado y se añaden 50 μl de solución de mejora a cada pocillo. La fluorescencia resuelta en el tiempo se mide después de 45 minutos en un generador de imágenes de microplacas Viewlux durante 15 segundos con una ventana de 354 μs, retraso de 400 μs, excitación a 360 nm y emisión a 618 nm. \ n Se siembran células PANC-1 y se tratan con BRD4770 en placas de 6 pocillos durante 72 h. Las células se tripsinizan y se analizan para determinar la formación de colonias de agar blando usando el ensayo de transformación celular CytoSelect de 96 pocillos, usando el colorante CyQuant GR para medir los niveles de ácido nucleico celular total. La fluorescencia se detecta con un lector de placas Analyst HT utilizando un juego de filtros de 485/520 nm.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de histona metiltransferasa