PQ 401 196868-63-0

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Actividad biológica PQ 401 es un inhibidor de IGF-1R e inhibe la autofosforilación del dominio quinasa IGF-IR en concentraciones PQ 401 (50 mg / kg, 100 mg / kg) inhibe significativamente el crecimiento tumoral MCNeuA de una manera dependiente de la dosis. Autofosforilación del péptido IGF-IR Se incubó un microgramo de péptido del dominio quinasa IGF-IR constitutivamente activo +/- concentraciones variables de PQ 401 en DMSO al 2% en Tris 40 mM (pH 7,4), 80 μMEGTA, 2-mercaptoetanol al 0,25%, Na3VO4 80 μM, 10 MgCl2 mM y MnCl2 2 mM durante 20 minutos. Luego se agrega ATP a una concentración final de 20 μM. Se permite que se produzca la autofosforilación del péptido del dominio quinasa durante 20 minutos a 22 ° C. La reacción se detiene mediante la adición de tampón reductor de SDS y las muestras se procesan en SDS-PAGE. Después de la transferencia a la membrana de nitrocelulosa, la autofosforilación del péptido se determina mediante transferencia Western empleando un anticuerpo contra la fosfotirosina (PY20). \ n Método Los efectos inhibidores de diarilurea sobre el crecimiento de células de cáncer de mama se determinan usando un kit de ensayo de proliferación celular CyQuant. Las células MCF-7 o MCNeuA se cultivan en placas de 96 pocillos (5 x 103 por pocillo) en DMEM sin rojo de fenol suplementado con FCS al 10%. Se prepara un plato para cada día de cosecha. Se deja que las células se adhieran durante la noche y luego se tratan con diversas concentraciones de diarilurea o DMSO como control de vehículo. Los cultivos de microplacas se recolectan los días 0, 1, 2 y 3 invirtiendo la microplaca sobre toallas de papel con un suave borrado para eliminar el medio de crecimiento sin romper las células adherentes. Cada placa se mantiene a -80 ℃ hasta el final del experimento (día 3) cuando todas las placas se descongelan y se analizan juntas. Después de descongelar, se añaden 200 μL de solución CyQuant GR a cada pocillo y las placas se incuban en la oscuridad durante 2 a 5 minutos. La fluorescencia se mide con un lector de microplacas de fluorescencia SpectraMax Gemini XS con excitación de 480 nm y emisión de 520 nm. El índice de proliferación se calcula como el porcentaje de contenido de nucleótidos frente a las células de control en el día 0.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de IGF-1R