Picropodofilina (PPP) 656820-32-5

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 393.23 La picropodofilina (PPP) es un inhibidor selectivo de IGF-1R con IC50 de 1 nM. Fase 1/2. \ n Actividad biológica En células intactas, PPP inhibe eficazmente la fosforilación de IGF-1R, Akt (Ser 473) y Erk1 / 2 estimulada por IGF-1. La picropodofilina inhibe específicamente el crecimiento celular e induce la apoptosis en células tumorales positivas para IGF-1R cultivadas. La picropodofilina sensibiliza sinérgicamente las células HMCL, MM humano primario y 5T33MM murinas a ABT-737 y ABT-199 al disminuir aún más la viabilidad celular y mejorar la apoptosis. La picropodofilina y el sorafenib suprimen sinérgicamente la proliferación y la motilidad de las células del carcinoma hepatocelular. En ratones SCID xenoinjertados con ES-1, BE y PC3 humanos, la picropodofilina (20 mg / kg / 12 h, ip) provoca una regresión tumoral completa. En el modelo de ratón 5T33MM, la picropodofilina también muestra una marcada actividad antitumoral y provoca un aumento significativo en la supervivencia. \ n Ensayos de tirosina quinasa in vitro Se realiza el ensayo de fosforilación de sustrato catalizada por IGF-1R de pTG, usando un kit de ensayo de tirosina quinasa en placa de 96 pocillos. Usamos receptor del factor de crecimiento epidérmico recombinante, IR inmunoprecipitado de HEPG2, IGF-1R inmunoprecipitado de células P6 y sobrenadante inmunodepletado de IGF-1R de P6 (que representa [tirosina quinasas no IGF-1R "). Después de 30 min de tratamiento de los receptores con los compuestos deseados en el tampón de quinasa [tampón HEPES 50 mM (pH 7,4), MgCl2 20 mM, 0,1 MnCl2 y Na3VO4 0,2], la reacción de quinasa se activa mediante la adición de ATP. El sustrato de polímero fosforilado se sondea con una fosfotirosina- anticuerpo monoclonal específico conjugado con peroxidasa de rábano picante, clon PT-66. El color se desarrolla con el sustrato cromogénico de peroxidasa de rábano picante diclorhidrato de O-fenilendiamina y se cuantifica mediante espectrofotometría (lector de ELISA). La autofosforilación de tirosina de IGF-1R se analiza mediante un ensayo ELISA en sándwich. Brevemente, 96 Las placas de pocillos se recubren durante la noche a 4 ° C con 1 μg / pocillo de un anticuerpo contra la subunidad β de IGF-1R. Las placas se bloquean con BSA al 1% en PBS Tween durante 1 h, y luego 80 mg / pocillo de tot Se añade un lisado de proteína de la línea celular P6. Como control negativo utilizamos lisado de proteína total de la línea celular R-. Los compuestos investigados se añaden en tampón de tirosina quinasa sin ATP a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de la activación de la quinasa con ATP. El ensayo de quinasa se realiza usando el kit Sigma (ver arriba). Después de la espectrofotometría, los valores de IC50 de los inhibidores se determinan utilizando la función REGRESIÓN del programa Statistica. Método Las determinaciones se realizan utilizando el kit de proliferación celular II, que se basa en el cambio colorimétrico de la sal amarilla de tetrazolio 2,3-bis [2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil] -2H-tetrazolio-5-carboxanilida interna sal en colorante formazán naranja por la cadena respiratoria de la célula viable. Todos los estándares y experimentos se realizan por triplicado.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de IGF-1R