.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 572.34 Refametinib (RDEA119, Bay 86-9766) es un inhibidor potente, ATP no competitivo y altamente selectivo de MEK1 y MEK2 con IC50 de 19 nM y 47 nM, respectivamente. \ n Actividad biológica RDEA119 se une selectivamente directamente a un bolsillo alostérico en las enzimas MEK1 / 2 y es altamente eficaz para inhibir la proliferación celular en varias líneas de células tumorales, incluidas A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 y BxPC3. RDEA119 inhibe el crecimiento dependiente del anclaje de las líneas celulares de cáncer humano que albergan el mutante V600E BRAF de ganancia de función con valores de GI50 que oscilan entre 67 y 89 nM. En condiciones independientes del anclaje, los valores de GI50 para todas las líneas celulares probadas son similares (40-84 nM). RDEA119 muestra una selectividad tisular que reduce su potencial de efectos secundarios relacionados con el sistema nervioso central. RDEA119 inhibe de forma potente la proliferación de las 4 líneas celulares que albergaban la mutación BRAF, pero no tiene efectos modestos en las otras 4 células que albergaban BRAF de tipo salvaje (IC50 de 0,034-0,217 μM frente a 1,413-34,120 μM). Este efecto inhibidor de RDEA119 en líneas celulares seleccionadas OCUT1 (BRAF V600E (+), PIK3CA H1047R (+)) y SW1376 (BRAF V600E (+)) se potencia mediante la combinación con el inhibidor de mTOR, temsirolimus. RDEA119 y temsirolimus también muestran efectos sinérgicos sobre la muerte autofágica de las células OCUT1 y KAT18 probadas selectivamente. La administración oral de RDEA119 a 50 mg / kg en un programa de una vez al día × 14 conduce a una inhibición del crecimiento tumoral (TGI) del 68% en el modelo de tumor de melanoma humano A375. La administración oral de RDEA119 a 25 mg / kg en un programa de una vez al día × 14 conduce a un TGI del 123% en el modelo tumoral Colo205 de carcinoma de colon humano (TGI> 100% ocurre cuando el tumor se encoge por debajo de su volumen inicial). Una dosis de 25 mg / kg una vez al día × 14 produce 56% y 67% de TGI para los tumores HT-29 y A431, respectivamente. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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MEK Kinase Assay
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Kinase inactive murine ERK2 (mERK2) K52A/T183A is affinity purified from Escherichia coli expressed using the pET21a vector. MEK1 kinase activity is determined using mERK2 K52A T183A as the substrate. Recombinant MEK1 enzyme (5 nM) is first activated by 0.02 unit or 1.5 nM of RAF1 in the presence of 25 mM HEPES (pH 7.8), 1 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.2 mM EDTA, and 50 μM ATP for 30 minutes at 25 °C. The reactions are initiated by adding 2 μM of mERK2K52A T183A and 2.5 μCi [γ-33P] ATP in a total volume of 20 μL. The MEK2 kinase activity is determined similarly except that activation by RAF1 is not needed and 11 nM of MEK2 enzyme (active) are used in the assays.Kinase profiling is performed by Invitrogen using their Select Screen Kinase Profiling Service. The Z'-LYTE biochemical assay is used. RDEA119 is assayed in quadruplicate at 10 μM against 205 kinases.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 and BxPC3 cells
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Concentrations
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10-1000 nM
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Incubation Time
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48 hours
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Method
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For anchorage-dependent growth inhibition experiments, cells are plated in white 384-well plates at 1,000/20 μL/well or white 96-well microplates at 4,000/100 μL/well. After 24-h incubation at 37 °C, 5% CO2, and 100% humidity, RDEA119 is incubated for 48 hours at 37 °C and assayed using CellTiter-Glo. For the 96-well anchorage-independent growth assay, wells of an [ultralow binding" plate (Corning) are filled with 60 μL of a 0.15% agarose solution in complete RPMI 1640. Then, 60 μL of complete RPMI 1640 containing 9,000 cells in 0.15% agarose are added per well. After 24 hour, 60 μL of a 3 × drug solution in agarose-free complete RPMI 1640 are added. After 7 d, 36 μL of 6 × 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)- 2H-tetrazolium, inner salt reagent are added per well. After 2 hours at 37 °C, absorbance at 490 nm is determined on the M5 plate reader.
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Estudio con animales: [1]
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Animal Models
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Female athymic nude mice are injected s.c. with A375, HT-29 and A431 tumor; male athymic nude mice with Colo205 tumor.
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Formulation
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RDEA119 is dissolved in saline.
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Dosages
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25 or 50 mg/kg
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Administration
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Orally once daily for 14 days
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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572.34
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Formula
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C19H20F3IN2O5S
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CAS No.
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923032-37-5
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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BAY 869766
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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100 mg/mL
(174.72 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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100 mg/mL
(174.72 mM)
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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(S)-N-(3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodophenylamino)-6-methoxyphenyl)-1-(2,3-dihydroxypropyl)cyclopropane-1-sulfonamide
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : MAPK > Inhibidor de MEK
