ME0328 1445251-22-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 321.37 ME0328 es un inhibidor de PARP potente y selectivo con IC50 de 0.89 μM para PARP3, aproximadamente 7 veces más selectividad que PARP1. \ n Actividad biológica ME0328 es soluble, permeable a las células y metabólicamente estable en microsomas de hígado humano y hepatocitos de rata. ME0328 (10 μM) da como resultado un retraso significativo de la resolución de los focos de γH2AX al afectar a ARTD3 en las células A549 y MRC5 sin una toxicidad significativa. Ensayos enzimáticos La ribosilación de ADP de proteínas se mide usando proteínas ARTD marcadas con hexahistidina y proteínas histonas recombinantes capturadas en placas quelantes de Ni2 + de 96 pocillos (5-PRIME). Las reacciones de ribosilación de ADP se inician mediante la adición de NAD + (2% biotinilado) y los productos de reacción modificados se detectan mediante quimioluminiscencia. Los valores de Km se estiman utilizando gráficos de tasas iniciales frente a concentraciones de NAD + y ajuste de curvas lineales con GraphPad Prism. Todos los compuestos se disuelven en dimetilsulfóxido (DMSO) hasta una concentración de stock de 50 mM. Los experimentos para determinar los valores de CI50 se llevan a cabo con concentraciones de compuesto en el rango entre 10 nM y 450 µM con una concentración de DMSO del 1% (v / v). Las mediciones se llevan a cabo a una concentración de NAD + por debajo de Km para cada transferasa. Los valores de CI50 se estiman mediante el ajuste de curvas con GraphPad Prism. Los valores reportados representan medias ± SE de los ajustes de las curvas basados ​​en experimentos duplicados o triplicados, cada uno determinado en base a tres repeticiones. Método \ n Se evalúa la citotoxicidad del compuesto en células A549 y MRC5 usando ensayos WST-1. Las células A549 se cultivan en medio de Eagle modificado de Dulbecco complementado con suero de ternero fetal (FCS) al 10%, penicilina y estreptomicina. Las células MRC5 se cultivan en medio esencial mínimo suplementado con FCS al 10%, penicilina, estreptomicina y l-glutamina. Ambas líneas celulares se mantienen en una incubadora humidificada a 37 ° C y CO2 al 5%.
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Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de PARP