Tubastatina A 1252003-15-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 335.4 Tubastatin A es un inhibidor de HDAC6 potente y selectivo con IC50 de 15 nM. Es selectivo contra todas las demás isoenzimas (1000 veces) excepto HDAC8 (57 veces). \ N Actividad biológica La tubastatina A es selectiva en todas las isoenzimas excepto HDAC8 y mantiene una selectividad 1000 veces mayor contra todas las isoformas excluyendo HDAC8, donde tiene selectividad de aproximadamente 57 veces. La tubastatina A induce preferentemente la hiperacetilación de la α-tubulina a 2,5 µM. Se observa una ligera inducción de hiperacetilación de histonas para Tubastatin A a 10 µM. La tubastatina A muestra una protección dependiente de la dosis contra la muerte de células neuronales inducida por ácido homocisteico a partir de 5 μM con una protección casi completa a 10 μM. La tubastatina A (10 µM) induce un aumento en los niveles de α-tubulina acetilada y la restauración de la expresión de los cilios primarios en las líneas celulares de colangiocarcinoma (18 veces); y la restauración de los cilios primarios se correlacionó con las vías de señalización de Hedgehog (Hh) y MAPK reguladas negativamente, así como la disminución de las tasas de proliferación celular (en promedio un 50%) y la invasión (en un 40%). La tubastatina A muestra una inhibición significativa de TNF-α e IL-6 en macrófagos THP-1 humanos estimulados con LPS con una CI50 de 272 nM y 712 nM. Tubastatin A inhibe la secreción de óxido nítrico (NO) en macrófagos murinos Raw 264.7 de forma dependiente con una CI50 de 4.2 μM. Tubastatin A reduce el crecimiento de colangiocarcinoma in vivo. La tubastatina A (10 mg / kg) induce un peso tumoral medio 6 veces menor en el modelo ortotópico de rata singénico de colangiocarcinoma, y ​​reduce las relaciones de peso del tumor con respecto al peso del hígado y el peso corporal (5 y 5,6 veces, respectivamente), así como una mayor frecuencia de colangiocitos ciliados en comparación con los controles (29% vs 1,4%). La tubastatina A disminuye significativamente la cantidad de células positivas para PCNA en los tumores tratados en comparación con los controles de vehículo (34% frente a 65%). Tubastat A muestra una inhibición significativa del volumen de la pata a 30 mg / kg ip en un modelo animal de inflamación inducida por adyuvante completo de Freund (FCA). Tubastat A (30 mg / kg ip) atenúa significativamente las puntuaciones clínicas (~ 70%) y la expresión de IL-6 en los tejidos de las patas del ratón DBA1 con artritis inducida por colágeno. \ n Ensayos enzimáticos de HDAC La tubastatina A se disuelve y diluye en tampón de ensayo (HEPES 50 mM, pH 7,4, KCl 100 mM, Tween-20 al 0,001%, BSA al 0,05% y tris (2-carboxietil) fosfina 20 μM) a 6- veces de la concentración final. Las enzimas HDAC se diluyen hasta 1,5 veces la concentración final en tampón de ensayo y se preincuban con Tubastatina A durante 10 minutos antes de la adición del sustrato. La cantidad de FTS (HDAC1, HDAC2, HDAC3 y HDAC6) o MAZ-1675 (HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC8 y HDAC9) utilizada para cada enzima es igual a la constante de Michaelis (Km), determinada por una curva de titulación . FTS o MAZ-1675 se diluye en tampón de ensayo hasta 6 veces la concentración final con tripsina de grado de secuenciación 0,3 µM. La mezcla de sustrato / tripsina se agrega a la mezcla de enzima / compuesto y la placa se agita durante 60 segundos y luego se coloca en un lector de placas de microtitulación SpectraMax M5. La reacción enzimática se controla para la liberación de 7-amino-4-metoxi-cumarina durante 30 minutos, después de la desacetilación de la cadena lateral de lisina en el sustrato peptídico, y se calcula la velocidad lineal de la reacción. Método El crecimiento independiente del anclaje se evalúa cultivando células en agar blando. Aproximadamente 25.000 células suspendidas en agar al 0,4% en medio de cultivo se colocan en capas sobre una capa de agar al 1% en una placa de 6 pocillos. Los medios se agregan dos veces por semana y se toman fotografías después de 21 días de incubación. El número y tamaño de las colonias se analizan utilizando el software Gel-Pro.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de PARP