Crenolanib (CP-868596)

Peso molecular: 443.54 Crenolanib (CP-868596) es un inhibidor potente y selectivo de PDGFRα / β con Kd de 2.1 nM / 3.2 nM, también inhibe de manera potente FLT3, sensible a la mutación D842V no a la mutación V561D,> 100 veces más selectivo para PDGFR que c-Kit, VEGFR-2, TIE-2, FGFR-2, EGFR, erbB2 y Src. \ n Actividad biológica Crenolanib es significativamente más potente que imatinib en la inhibición de la actividad quinasa de PDGFRα quinasas resistentes a imatinib (D842I, D842V , D842Y, D1842-843IM y deleción I843). Crenolanib es 135 veces más potente que imatinib contra D842V en el sistema modelo isogénico, con una CI50 de aproximadamente 10 nM. Crenolanib inhibe la actividad quinasa del oncogén de fusión en la línea celular EOL-1, que se deriva de un paciente con leucemia eosinofílica crónica y expresa la quinasa de fusión FIP1L1-PDGFRα activada constitutivamente, con IC50 = 21 nM. \ n Crenolanib también inhibe la proliferación de células EOL-1 con IC50 = 0,2 pM. Crenolanib inhibe la activación de quinasas mutantes V561D o D842V expresadas en células BaF3 con IC50 con 85 nM o 272 nM, respectivamente. Crenolanib inhibe la activación de PDGFRα en la línea celular de cáncer de pulmón de células no pequeñas H1703 que tiene una amplificación de 24 veces de la región 4q12 que contiene el locus PDGFRα, con IC50 con 26 nM. Crenolanib es un PDGFR TKI selectivo, altamente potente y biodisponible por vía oral. El crenolanib es un compuesto de bencimidazol que tiene CI50 de 0,9 nM y 1,8 nM para PDGFRA y PDGFRB, respectivamente. Evaluación bioquímica de la actividad quinasa de PDGFRα Se transfectan transitoriamente células de ovario de hámster chino (CHO) con construcciones de PDGFRα mutado o de tipo salvaje y se tratan con diversas concentraciones de crenolanib. Los experimentos que involucran ADN recombinante se realizan utilizando condiciones de nivel 2 de bioseguridad de acuerdo con las pautas. Se preparan lisados ​​de proteínas de líneas celulares y se someten a inmunoprecipitación usando anticuerpos anti-PDGFRα seguido de inmunotransferencia secuencial para PDGFRα. \ n La densitometría se realiza para cuantificar el efecto del fármaco utilizando el software Photoshop, con el nivel de fósforo-PDGFRα normalizado a la proteína total. Los resultados experimentales de densitometría y proliferación se analizan utilizando el software Calcusyn 2.1 para determinar matemáticamente los valores de IC50. La prueba de suma de rangos de Wilcoxon se utiliza para comparar los valores de CI50 de crenolanib para una mutación determinada. Método \ n Las células se añaden a placas de 96 pocillos a densidades de 20.000 células / pocillo y se incuban con crenolanib durante 72 horas antes de medir la proliferación celular utilizando 2,3-bis [2-metoxil-4-nitro-5-sulfofenilo ] Ensayo basado en -2H-tetrazolio-5-carboxanilida (XTT). \ n \ n

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de PDGFR