.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 460.45 OSU-03012 es un potente inhibidor de PDK-1 recombinante con IC50 de 5 μM y un aumento del doble de potencia sobre OSU-02067. \ n OSU-03012 induce apoptótica muerte en células PC-3 con IC50 de 5 µM y reduce la actividad de p70S6K inmunoprecipitado. OSU-03012 suprime completamente el crecimiento celular en una amplia gama de líneas de células tumorales a concentraciones de 3 a 5 μm, en comparación con la concentración de al menos 50 μm requerida para celecoxib. OSU-03012 promueve la muerte celular en mayor medida en las células de glioma que en los astrocitos no transformados. OSU-03012 provoca una inducción de muerte celular dependiente de la dosis que no se ve alterada por la mutación de p53, la expresión de ERBB1 VIII o la pérdida de la función de fosfatasa y tensina debido a una deleción homóloga en el cromosoma 10. OSU-03012 y la radiación ionizante causan un aditivo , elevación independiente de caspasa en la destrucción de células. La letalidad de OSU-03012 como agente único o cuando se combina con moduladores de señalización no se modifica en células que carecen de expresión de BIM o de BAX / BAK. OSU-03012 promueve la liberación de catepsina B del compartimento lisosómico y la de AIF de las mitocondrias. La letalidad de OSU-03012 se atenúa en las células del retículo quinasa endoplásmico similar a la proteína quinasa R, que se correlaciona con la escisión reducida de BID y la supresión de la liberación de catepsina B y AIF en el citosol. OSU-03012 inhibe la proliferación de células cancerosas de tiroides (células NPA, WRO y ARO), la migración e induce la apoptosis, lo que da como resultado un aumento de células en la fase S sin un aumento de células en G2. OSU-03012 es un inhibidor competitivo de ATP de la actividad de PAK y suprime la fosforilación de AKT en las células de cáncer de tiroides. OSU-03012 inhibe el crecimiento celular de las líneas celulares de carcinoma hepatocelular, incluidas las células Huh7, Hep3B y HepG2 con valores de CI50 por debajo de 1 μM. OSU-03012 no suprime la actividad de PDK1 o AKT ni induce la apoptosis celular, pero induce la autofagia en las células Huh7. Además, la acumulación de especies reactivas de oxígeno (ROS) se detecta después del tratamiento con OSU-03012. Un estudio reciente muestra que OSU-03012 podría mejorar la susceptibilidad de las líneas celulares mutantes (Bcr) -Abl a la apoptosis inducida por imatinib. \ n OSU-03012 suprime el crecimiento tumoral en 57,59% y aumenta la LC3 escindida en xenoinjertos tumorales Huh7 a 200 mg / kg. OSU-03012 disminuye notablemente la expresión de la proteína EGFR en los tumores en un 48% en comparación con los controles de vehículo y también evita que YB-1 se una al promotor EGFR en xenoinjertos MDA-MB-435 / LCC6. OSU-03012 se tolera bien e inhibe el crecimiento de xenoinjertos de schwannoma HMS-97 en un 55% después de la administración oral. \ n Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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PDK-1 Kinase Assay
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This in vitro assay is performed using a PDK-1 kinase assay kit. This cell-free assay is based on the ability of recombinant PDK-1, in the presence of DMSO vehicle or OSU-03012, to activate its downstream serum- and glucocorticoid-regulated kinase which, in turn, phosphorylates the Akt/serum- and glucocorticoid-regulated kinase-specific peptide substrate RPRAATF with [γ-32P]ATP. The 32P-phosphorylated peptide substrate is then separated from the residual [γ-32P]-ATP by using P81 phosphocellulose paper and quantitated in a scintillation counter after three washes with 0.75% phosphoric acid.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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PC-3 cells
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Concentrations
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0-10 μM
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Incubation Time
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~72 hours
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Method
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The effect of OSU-03012 on PC-3 cell viability is assessed by using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay in six replicates. Cells are grown in 10% FBS- supplemented RPMI 1640 in 96-well, flat-bottomed plates for 24 hours. They are exposed to various concentrations of OSU-03012 (0-10 μM) dissolved in DMSO (final concentration ≤0.1%) in 1% serum-containing RPMI 1640 for different time intervals (~72 hours). Controls receive DMSO vehicle at a concentration equal to that in OSU-03012-treated cells. The medium is removed and replaced by 200 μL of 0.5 mg/mL 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide in 10% FBS-containing RPMI 1640. The cells are incubated in the CO2 incubator at 37 °C for 2 hours. Supernatants are removed from the wells, and the reduced 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide dye is solubilized in 200 μL DMSO per well. Absorbance at 570 nm is determined by using a plate reader.
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Estudio con animales: [4]
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Animal Models
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Huh7 tumor xenografts in male BALB/c nude mice
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Formulation
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Dissolved in 0.5% methylcellulose, 0.1% Tween 80
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Dosages
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100-200 mg/kg
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Administration
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Daily by gavage
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Solubility
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0.5% methylcellulose/0.2% Tween 80,
30 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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460.45
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Formula
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C26H19F3N4O
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CAS No.
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742112-33-0
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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11 mg/mL
(23.88 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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0.5% methylcellulose/0.2% Tween 80
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30 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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2-amino-N-(4-(5-(phenanthren-2-yl)-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)acetamide
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : PI3K / Akt / mTOR > Inhibidor de PDK-1
