.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} Peso molecular: 488,74 PIK-75 es un inhibidor de p110α con IC50 de 5,8 nM (200 veces más potente que p110β), mutantes específicos de isoforma en Ser773 y también inhibe de forma potente la DNA-PK con IC50 de 2 nM. \ n PIK-75 muestra la impresionante potencia y selectividad de isoformas en p110α, mientras que los valores IC50 correspondientes son 1300 nM, 76 nM y 510 nM para otras isoformas de PI3K, p110β, -γ y -δ, respectivamente. Además, cuando se une a p110α purificado, PIK-75 es un inhibidor no competitivo con respecto al ATP con Ki de 36 nM y competitivo con respecto al sustrato PI con Ki de 2,3 nM. PIK-75 también muestra una potente inhibición de DNA-PK. PIK-75 (1 μM) reduce la supervivencia celular al disminuir significativamente la actividad mitocondrial en células de músculo liso de las vías respiratorias no estimuladas (ASM) no estimuladas, células ASM asmáticas y fibroblastos pulmonares. Mientras que en las células ASM estimuladas con TGFβ, PIK75 solo disminuye la actividad mitocondrial en las células asmáticas sin efectos en las células no asmáticas. Un estudio reciente muestra que PIK-75 (10 nM) inhibe la expresión de ARNm de CD38 inducida por TNF-α y atenúa significativamente la actividad de ADP-ribosil ciclasa inducida por TNF-α en células de músculo liso de las vías respiratorias humanas. En el modelo de tumor ErbB3WT, PIK-75 reduce la respuesta quimiotáctica in vitro a HRGβ1 y reduce los niveles de pAkt en un 40%. Además, PIK-75 reduce significativamente la motilidad de las células tumorales y la invasión in vivo en tumores primarios ErbB3WT. [5] En los ratones machos CD1, PIK-75 conduce a graves deficiencias en la prueba de tolerancia a la insulina (ITT) y la prueba de tolerancia a la glucosa (GTT), y un aumento en la producción de glucosa durante una prueba de tolerancia al piruvato (PTT). El inhibidor de PI3K PIK-75 se disuelve a 10 mM en dimetilsulfóxido y se almacena a -20 ° C hasta su uso. La actividad de la enzima PI3K se determina en 50 μL de HEPES 20 mM, pH 7,5 y MgCl2 5 mM que contiene fosfatidil inositol 180 μM, con la reacción iniciada mediante la adición de ATP 100 μM (que contiene 2,5 μCi de [γ-32P] ATP). Después de una incubación de 30 minutos a temperatura ambiente, la reacción enzimática se detiene mediante la adición de 50 μL de HCl 1 M. A continuación, los fosfolípidos se extraen con 100 µl de cloroformo / metanol [1: 1 (v / v)] y 250 µl de KCl 2 M seguido de recuento de centelleo líquido. Los inhibidores se diluyen en dimetilsulfóxido al 20% (v / v) para generar una concentración frente a la inhibición de la curva de actividad enzimática, que luego se analiza con el uso de Prism versión 5.00 para Windows para calcular el IC50. Para el análisis cinético, se utiliza un ensayo luminiscente que mide el consumo de ATP. La actividad de la enzima PI3K se determina en 50 μL de HEPES 20 mM, pH 7,5 y MgCl2 5 mM con PI y ATP a diversas concentraciones. Después de una incubación de 60 minutos a temperatura ambiente, la reacción se detiene mediante la adición de 50 μL de Kinase-Glo seguido de una incubación adicional de 15 minutos. A continuación, se lee la luminiscencia utilizando un lector de placas Fluostar. Los resultados se analizan utilizando Prism. \ n La actividad mitocondrial se evalúa después de la estimulación con TGFβ con o sin inhibidores durante 48 horas usando el ensayo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolio (MTT). Las células lavadas recolectadas se resuspenden en DMEM al 10% de FCS y se distribuyen en alícuotas (500 µl) en placas de agrupamiento de 24 pocillos antes de la dilución en serie (1: 2) por duplicado. A cada pocillo, se añaden 100 μL de una concentración de MTT adecuada (disueltos en PBS y filtrados a través de un filtro de 0,2 μm antes de su uso para eliminar cualquier producto de formazán azul) inmediatamente después de diluir las células, que luego se incuban durante 3,5 horas a 37 ° C. . El producto de formazán azul resultante se solubiliza durante la noche (16 horas) a 37ºC mediante la adición de 500 µl de dodecilsulfato de sodio (SDS) al 10% en HCl 0,01 M a cada pocillo. Se transfiere una muestra (150 μL) de cada pocillo duplicado a una microplaca de 96 pocillos y se determina la densidad óptica mediante espectrofotometría automatizada frente a un blanco de reactivo (sin células). La absorbancia se mide a una longitud de onda de prueba de 570 nm y una longitud de onda de referencia de 690 nm. Para cada cultivo de células primarias, se promedian los resultados de tres a seis pocillos de cada tratamiento y los datos se expresan como absorbancia de 570 a 690 nm. \ N
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Animal Models
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MTLn3 cells are injected into the right fourth mammary fat pad from the head of female severe-combined immunodeficient/NCr mice.
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Formulation
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PIK-75 is dissolved in DMSO and then diluted in PBS.
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Dosages
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≤1 μM
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Administration
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Administered via i.p.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
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0.025
|
0.02
|
0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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488.74
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Formula
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C16H14BrN5O4S.HCl
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CAS No.
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372196-77-5
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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3 mg/mL
(6.13 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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(E)-N'-((6-bromoH-imidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)methylene)-N,2-dimethyl-5-nitrobenzenesulfonohydrazide hydrochloride
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : PI3K / Akt / mTOR > Inhibidor de PI3K
