Wortmannin 19545-26-7

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 428.43 Wortmannin es el primer inhibidor de PI3K descrito con IC50 de 3 nM, con poca selectividad dentro de la familia PI3K. También bloquea la formación de autofagosomas e inhibe de forma potente DNA-PK / ATM con IC50 de 16 nM y 150 nM. \ n La inhibición de MLCK por Wortmannin no se ve afectada por la calmodulina o el sustrato peptídico, mientras que se reduce por una alta concentración de ATP. La wortmanina interactúa directamente con el dominio catalítico de MLCK y conduce a una pérdida irreversible de la actividad enzimática. La wortmanina no inhibe la proteína cinasa dependiente de cAMP, la proteína cinasa dependiente de cGMP y la proteína cinasa II dependiente de calmodulina, y tiene poco efecto sobre la actividad de la proteína cinasa C. Wortmannin inhibe la formación de N-formilmetionil-leucilfenilalanina (fMLP) estimulada por PtdInsP3 (fosfatidilinositol 3,4,5-trifosfato) con IC50 de 5 nM y esta inhibición se elimina por completo cuando se pretrata con 100 nM de Wortmanina en neutrófilos humanos y niveles elevados de PtdInsP2. sin efectos sobre el contenido de PtdInsP y PtdIns celular. Wortmannin podría desarrollar cambios oscilatorios en el contenido de F-actina y no inhibe la polimerización de actina estimulada por fMLP en neutrófilos. La wortmanina inhibe irreversiblemente la actividad de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3-quinasa) con la unión a la proteína de 110 kDa (CI50 de 3 nM) y no tiene ningún efecto sobre la PI4-quinasa en las células RBL-2H3. Wortmannin también inhibe la secreción de histamina mediada por Fc epsilon RI y la liberación de leucotrienos, sin efecto sobre la activación de la tirosina quinasa Lyn. Wortmannin anula por completo la captación de hexosa inducida por insulina en adipocitos de rata aislados a 0,1 μM, sin alterar la actividad lipolítica estimulada por isoproterenol. La wortmanina suprime la producción de óxido nítrico inducida por insulina en un 50% a 500 nM en las células endoteliales de la vena umbilical humana, que es en respuesta al IGF-1. Wortmannin suprime la reparación de la rotura de la doble hebra del ADN (DSB) y no tiene ningún efecto sobre los niveles de DSB o la cinética de la reparación de la rotura de una sola hebra (SSB) en las células de ovario de hámster chino a 50 μM. Wortmannin podría potenciar la citotoxicidad inducida por radiación ionizante (IR) sin toxicidad por sí misma. La wortmanina inhibe la actividad de la quinasa tipo polo (PLK1) IC50 de 24 nM en células intactas detenidas en G2 / M. La wortmanina aumenta la acumulación de IL-6 mediada por el receptor tipo Toll (TLR) en macrófagos humanos con una CE50 de 50 nM. Mientras tanto, Wortmannin mejora significativamente la expresión de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) mediada por TLR y la acumulación de nitrito en macrfagos de ratón. La wortmanina activa el factor nuclear κB y regula al alza la producción de ARNm de citocinas. La wortmanina también inhibe la quinasa tipo Polo (PlK) 1 y PlK3, que desempeñan funciones importantes en la mitosis. El tratamiento con wortmanina podría conducir a una reducción de la fosforilación de p53 en la serina 20 inducida por daño del ADN. Wortmannin suprime la fosforilación de Akt inducida por hialuronano y la movilidad / migración celular en las células SW1990. Wortmannin inhibe la metástasis peritoneal de SW1990 en ratones a 1 mg / kg, sin pérdida de peso. Wortmannin inhibe la fosforilación de fosfatidilinositido 3-quinasa-proteína quinasa B (PKB) / Akt tanto en tejidos normales (homogeneizados de pulmón, corazón y cerebro) como en tejido tumoral en ratones, sin mortalidad ni toxicidad aguda a 0,7 mg / kg. En combinación con LY188011, Wortmannin aumenta significativamente la apoptosis e inhibe el crecimiento tumoral en el tumor ortotópico, mientras que ambas monoterapia no pudieron. \ N Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]

MLCK assay

MLCK activity is assayed with peptide substrate (KKRPQRATSNVFS-NH2) or myosin light chain. The peptide substrate (24 μM) is phosphorylated in a reaction mixture containing 25 mM Tris-HC1 (pH 7.5), 0.5 mg/mL bovine serum albumin, 4 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 2.6 nM calmodulin, 1.5 nM MLCK, and 400 μM ATP in a final volume of 0.25 mL. After a 10-min preincubation at 28 ºC without ATP, the reaction is started by addition of ATP at 28 ºC and terminated by the addition of 0.1 mL of 10% (v/v) acetic acid after 30 min. The mixture is analyzed by high performance liquid chromatography: column, Unisil Pack 5C18 4.6 X 150 mm; solvent, 18% (v/v) acetonitrile, 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid in water; flow rate, 1.0 mL/min; temperature, 40 ºC; detection, absorbance at 220 nm. Percent of reaction is calculated from the ratio of peak areas of phosphorylated form to those of unphosphorylated form. Specific activity measured under the conditions described above is 0.81 μmol/min/mg. Myosin light chain (108 μg/mL) is phosphorylated in a reaction mixture containing 25 mM Tris-HC1 (pH 7.5), 0.5 mg/mL bovine serum albumin, 4 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 4.2 nM calmodulin, 0.92 nM enzyme, and 10 μM[γ-32P]ATP (100-900 cpm/pmol) in a final volume of 0.25 mL. After a 3-min preincubation at 30 ºC without ATP, the reaction is started by the addition of [γ-32P]ATP at 30 ºC and stopped by the addition of 0.125 mL of trichloroacetic acid after 5 min. The acid-precipitable materials are collected on a nitrocellulose membrane filter and washed with four 1-mL aliquots of 5% (v/v) trichloroacetic acid. The radioactivity on the filter is measured in a toluene scintillation fluid, using a Packard Tri-Carb liquid scintillation spectrometer Model 4530. The specific activity measured under the conditions is 1.23 μmol/min/mg. [1]

PI3K assay

In an ordinary solution assay, partially purified PI3-kinase from calf thymus is used at a final concentration of 20 ng/mL. In the case of immunocomplex assay, P13-kinase activity is measured in immunoprecipitates with anti-PI3-kinase p85 antiserum, anti-

Estudio con animales: [11]

Animal Models	Human pancreatic adenocarcinoma cells PK1 are injected both s.c. and orthotopically into SCID mice.
Formulation	Dissolved at 0.4 mg/mL in DMSO, and diluted with 0.9% NaCl before use
Dosages	0.175, 0.35, and 0.7 mg/kg
Administration	Injected by i.v.
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 8 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversión de diferentes modelos de animales basados ​​en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Información química

Molecular Weight (MW)	428.43
Formula	C23H24O8
CAS No.	19545-26-7

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	86 mg/mL (200.73 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	8 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	3H-Furo[4,3,2-de]indeno[4,5-h]-2-benzopyran-3,6,9-trione, 11-(acetyloxy)-1,6b,7,8,9a,10,11,11b-octahydro-1-(methoxymethyl)-9a,11b-dimethyl-, (1S,6bR,9aS,11R,11bR)-

Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular

Grupos de Producto : PI3K / Akt / mTOR > Inhibidor de PI3K