Masitinib (AB1010) 790299-79-5

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 498.64 Masitinib es un inhibidor novedoso para Kit y PDGFRα / β con IC50 de 200 nM y 540 nM / 800 nM, inhibición débil de ABL y c-Fms. Fase 3. \ n Actividad biológica Masitinib es un inhibidor competitivo contra ATP a concentraciones ≤ 500 nM. Masitinib también inhibe de forma potente el PDGFR recombinante y la quinasa intracelular Lyn y, en menor medida, el receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos. Por el contrario, Masitinib demuestra una inhibición débil de Abl y c-Fms. Masitinib inhibe más fuertemente la desgranulación, la producción de citocinas y la migración de mastocitos de la médula ósea que el imatinib. En las células Ba / F3 que expresan el kit de tipo salvaje humano, masitinib inhibe la proliferación celular inducida por SCF (factor de células madre) con una CI50 de 150 nM, mientras que la CI50 para la inhibición de la proliferación estimulada por IL-3 es aproximadamente> 10 µM. En células Ba / F3 que expresan PDGFRα, masitinib inhibe la proliferación estimulada por PDGF-BB y la fosforilación de tirosina de PDGFRα con IC50 de 300 nM. Masitinib también inhibe la fosforilación de tirosina del kit humano estimulada por SCF en líneas celulares de mastocitoma y BMMC. Masitinib inhibe los mutantes de ganancia de función del kit, incluido el mutante V559D y el mutante de ratón Δ27 con IC50 de 3 y 5 nM en células Ba / F3. Masitinib inhibe la proliferación celular de líneas celulares de mastocitoma que incluyen HMC-1α155 y FMA3 con IC50 de 10 y 30 nM, respectivamente. Masitinib inhibe el crecimiento celular y la fosforilación de PDGFR en dos nuevas líneas celulares ISS, lo que sugiere que Masitinib muestra actividad contra la línea celular ISS primaria y metastásica y puede ayudar en el tratamiento clínico de ISS. Masitinib inhibe el crecimiento tumoral y aumenta el tiempo medio de supervivencia en modelos tumorales Ba / F3 que expresan Δ27 a 30 mg / kg, sin cardiotoxicidad ni genotoxicidad. Masitinib (12,5 mg / kg / d VO) aumenta el TTP (tiempo de progresión del tumor) general en comparación con el placebo en perros. La combinación de masitinib / gemcitabina muestra sinergia in vitro sobre la proliferación de líneas celulares refractarias a gemcitabina Mia Paca2 y Panc1, y en menor grado sobre tumores pancreáticos Mia Paca-2 en ratones NogCID. \ n Inmunoensayo enzimático in vitro con proteína quinasas recombinantes Una placa de microtitulación de 96 pocillos se recubre durante la noche con 0,25 mg / ml de poli (Glu, Tyr 4: 1), se enjuaga dos veces con 250 µL de tampón de lavado (solución salina tamponada con fosfato 10 mM). [pH 7,4] y Tween 20 al 0,05%) y se secó durante 2 horas a temperatura ambiente. Los ensayos se realizan a temperatura ambiente con un volumen final de 50 µL en tampón quinasa (MgCl2 10 mM, MnCl2 1 mM, ortovanadato de sodio 1 mM, HEPES 20 mM, pH 7,8) que contiene ATP a una concentración de al menos dos veces la Km para cada ensayo. enzima y una cantidad apropiada de enzima recombinante para asegurar una velocidad de reacción lineal. Las reacciones se inician tras la introducción de la enzima y se terminan con la adición de un volumen de reacción (50 µl) de EDTA 100 mM por mezcla de urea 5 M. Las placas se lavan tres veces y se incuban con anticuerpo monoclonal anti-fosfotirosina conjugado con peroxidasa de rábano picante 1: 30.000, luego se lavan tres veces y se incuban con tetrametilbencidina. El producto de reacción final se cuantifica mediante espectrofotometría a 450 nm. Método Para el ensayo de la proliferación de células Ba / F3, se siembran placas de microtitulación con un total de 104 células / pocillo en 100 μL de medio RPMI 1640 con suero bovino fetal al 10% a 37 ° C. Estos se complementan, o no, con medio acondicionado al 0,1% de células X63-IL-3 o SCF murino 250 ng / ml. El SCF murino, que activa el Kit, se purifica a partir del medio acondicionado de células CHO productoras de SCF. Las células se cultivan durante 48 horas a 37 ° C con Masitinib y luego se incuban con 10 μL / pocillo de reactivo WST-1 durante 3 horas a 37 ° C. La cantidad de colorante formazán formado se cuantifica por su absorbancia a 450 nm utilizando un espectrofotómetro de barrido de múltiples pocillos. Se utiliza un pocillo en blanco sin células como control de fondo para el espectrofotómetro.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de c-Kit