P22077 1247819-59-5

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 315.32 P22077 es un inhibidor de la proteasa específica de ubiquitina USP7 con EC50 de 8.6 μM, también inhibe la USP47 estrechamente relacionada. \ n P22077 es un análogo del inhibidor de USP7 recientemente descubierto P5091 . P22077 tiene una actividad insignificante frente a DEN1 y SENP2core en el rango de concentración probado, pero inhibe USP7 con una CI50 de 8 μM. Las actividades inhibidoras de P22077 in vitro contra un panel de DUB, cisteína proteasas y otras familias de enzimas proteolíticas demuestran que P22077 inhibe la USP7 y la DUB USP47 estrechamente relacionada. P22077 inhibe un subconjunto más pequeño de DUB a una concentración de 15 a 45 mM en lisados ​​celulares. P22077 induce la muerte celular (tumoral) con valores de CE50 en el rango micromolar bajo. La inhibición de P22077 exhibió cambios en los niveles de proteína ubiquitilada que son distintos del inhibidor de especificidad amplia. El tratamiento con P22077 de las células U2OS durante la liberación de la detención de G1 / S induce con hidroxiurea dio como resultado una pérdida dependiente de la dosis de la proteína claspin y una disminución concomitante de la fosfoserina 317 Chk1. Además, la EM cuantitativa sugiere que los componentes de ligasa de ubiquitina E3 RBX1, DCAF7, DCAF11 y la proteína de unión al daño del ADN 1 (DDB1) se reduzcan tras el tratamiento celular con P22077. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]

UbL-EKL assays

Unless stated otherwise, recombinant isopeptidase is mixed with UbL-EKL and EKLsubstrate I to final concentrations of 20, 50, and 20 nM, respectively, in a total volume of 100 μL in a well in a black-walled 96-well plate. All dilutions are performed in isopeptidase assay buffer (20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 2 mM CaCl2, and 2 mM β-mercaptoethanol). The increase in fluorescence intensity over time is determined on a Perkin Elmer Envision fluorescence plate reader with excitation and emission filters corresponding to the fluorescence resonance energy transfer peptide utilized. Unless stated otherwise, net relative fluorescence units (RFUs) are determined by subtracting the blank RFU value (20 nM EKL substrate I or 100 nM EKL substrate II in isopeptidase assay buffer) from each data point. SENP2core, SUMO3-EKL sensitivity experiments are performed by mixing 0–100 fM SENP2core with 50 nM SUMO3-EKL, and 100 nM EKL substrate I in a total volume of 100 μL as above.

Conversión de diferentes modelos de animales basados ​​en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

\ n Información química

Molecular Weight (MW)	315.32
Formula	C12H7F2NO3S2
CAS No.	1247819-59-5

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	63 mg/mL (199.79 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (

Chemical Name	Ethanone, 1-[5-[(2,4-difluorophenyl)thio]-4-nitro-2-thienyl]-

Stock Solution (1ml DMSO)	1mM	10mM	20mM	30mM
Mass(mg)	0.31532	3.1532	6.3064	9.4596

Grupos de Producto : Ubiquitina > Inhibidor DUB