AG-490 (Tirfostina B42) 133550-30-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 294.30 AG-490 (Tyrphostin B42) es un inhibidor de EGFR con IC50 de 0.1 μM, 135 veces más selectivo para EGFR que ErbB2, también inhibe JAK2 sin actividad a Lck, Lyn, Btk, Syk y Src. \ n Actividad biológica AG-490 inhibe la proliferación celular impulsada por HER-2 con IC50 de 3,5 μM. En correspondencia con la inhibición específica dependiente de la dosis de JAK2 activada constitutivamente en células de leucemia aguda (LLA) pre-B, AG-490 (5 μM) bloquea casi por completo el crecimiento de todas las células de LLA al inducir la muerte celular programada, sin efectos perjudiciales sobre hematopoyesis normal. AG-490 no inhibe las actividades de Lck, Lyn, Btk, Syk y Src. AG-490 (60-100 μM) bloquea la activación constitutiva de Stat3sm e inhibe el crecimiento espontáneo e inducido por interleucina 2 de células tumorales de micosis fungoide (MF) con valores de IC50 de 75 μM y 20 μM, respectivamente. AG-490 inhibe de forma potente el crecimiento de células T humanas mediado por IL-2 con una CI50 de 25 μM al bloquear las actividades de JAK3 y STAT5a / b. Aunque AG-490 solo no tiene ningún efecto sobre la proliferación de células FDrv210H a una concentración de 5 µM, AG-490 puede sinergizar con STI571 para mejorar su efecto inhibidor sobre la proliferación impulsada por p210bcr-abl. AG-490 inhibe significativamente la activación constitutiva de Stat3 en células MOPC, MPC11 y S194, lo que conduce a una apoptosis dependiente de la dosis espectacular. AG-490 (100 μM) inhibe la fosforilación de Akt, inhibe la activación del factor nuclear-κB y provoca la activación de GSK-3β, lo que lleva a la reducción de c-Myc. AG-490 (50 μM) puede inducir la apoptosis de células BaF3 resistentes a imatinib que expresan mutantes T315I y E255K de Bcr-Abl. AG-490 a 30 μM inhibe no solo la fosforilación inducida por Epo de JAK2 de tipo salvaje, sino también la fosforilación constitutiva del mutante JAK2 V617F. AG-490 también inhibe de forma potente el crecimiento celular independiente de citocinas inducido por el mutante JAK2 V617F en células BaF3. La administración de AG-490 reduce drásticamente el número de células CD45 + y HLA-DR + del 48% y el 46% en la médula ósea de los ratones no tratados, así como del 38% y el 22% en el bazo de los ratones no tratados a niveles de indetectales. La administración in vivo de AG-490 provoca apoptosis de células tumorales de mieloma murino pero no inhibe la activación de macrófagos mediada por IL-12 y la producción de IFN-γ por linfocitos. De acuerdo con el bloqueo in vitro de la actividad mutante JAK2 V617F, el tratamiento con AG-490 a 0,5 mg / día durante 10 días inhibe eficazmente la tumorigénesis inducida por el mutante JAK2 V617F y la invasión de células tumorales en ratones desnudos. La terapia combinada con AG-490 e IL-12 induce mayores efectos antitumorales que cualquier agente solo en un modelo de tumor de mieloma murino. \ n La autofosforilación de quinasa in vitro AG-490 se disuelve en DMSO al 10% -H2O-etanol al 45%. Los extractos de membrana brutos (0,125 μg / ml) se preactivan con EGF (20 nM) en tampón HEPES 50 mM, pH 7,6 y NaCl 125 mM, durante 15 minutos a 4 ° C. La actividad de autofosforilación de EGFR o ErbB2 quinasa se ensaya a 4ºC durante 30 segundos en placas de 96 pocillos en forma de V. Se añaden extractos de membrana (8 μL) a cada pocillo que contiene la mezcla de reacción (12 μL, 50 mM, HEPES, pH 7,4, NaCl 125 mM, M8Ac2 12 mM, MnCl2 2 mM, NaVO3 1 mM, ATP 1 μM y 1 μCi [γ -32P] ATP, concentraciones finales) y concentraciones crecientes de AG-490 (4 μL). Después de la terminación mediante la adición de tampón de muestra caliente, las muestras se procesan en un minigel de electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS al 6%, los geles se secan y se realiza la autorradiografía durante el período de tiempo de exposición lineal. Las bandas receptoras se escanean densitrométricamente y los resultados se analizan mediante el programa Ez-Fit. Para el análisis de la autofosforilación de JAK2, JAK2 se inmunoprecipita usando anticuerpo anti-JAK2 de lisados ​​de células G2 pretratadas durante 16 horas con concentraciones crecientes de AG-490 (0-50 µM). A continuación, los complejos inmunes se someten a inmunotransferencia con anticuerpo anti-fosfotirosina. Se demuestra una inhibición dependiente de la dosis de la actividad quinasa in vitro mediante la evaluación de la autofosforilación de JAK2.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de EGFR