AG-18 118409-57-7

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 186.17 AG-18 inhibe EGFR con IC50 de 35 μM. \ n Actividad biológica AG 18 inhibe EGFR e IR con Ki de 11 μM y 12 mM. AG 18 inhibe la autofosforilación de EGFR inducida por EGF con IC50 de 15 μM en células A431. AG 18 (10 µM) inhibe la proliferación de células GH3 inducida por EGF. AG 18 (10 µM) provoca una inhibición significativa de la proliferación celular inducida por grelina 10 nM y 1 µM. AG 18 (10 μM) bloquea el aumento estimulado por grelina en la fosforilación de ERK 1/2 en células GH3. AG 18 inhibe la liberación sensible al volumen de [3H] taurina en cultivos de astrocitos primarios de una manera dependiente de la dosis. AG 18 activa la liberación de D- [3H] aspartato dependiente del volumen inducida por la hinchazón a partir de cultivos astrocíticos primarios. AG 18 (300 µM) inhibe la estimulación inducida por TPA de la expresión de ICAM-1 de una manera dependiente de la dosis en células epiteliales A549. AG 18 (300 μM) también inhibe la unión a proteína de ADN de NF-kappaB estimulada por TPA y la actividad promotora de ICAM-1 en células epiteliales A549. AG 18 (300 µM) inhibe la unión a la proteína de ADN de NF-kappaB inducida por TNF-alfa y la actividad promotora de ICAM-1 de una manera dependiente de la dosis en las células epiteliales A549. La actividad de IKK es estimulada por TNF-alfa y TPA, y estos efectos son inhibidos por AG 18 (100 µM) en células epiteliales A549. AG 18 (10 μM) disminuye la potencia de 5-HT 4 veces y reduce la contracción máxima a 5-HT en la arteria carótida. AG 18 (10 µM) desplaza la contracción inducida por KCl 2 veces y provoca la inhibición máxima significativa. \ n Autofosforilación del receptor de EGF El receptor de EGF purificado con WGA de las células A431 (0,5 μg / ensayo) se activa con EGF (800 nM) durante 20 min a 4. La reacción se inicia mediante la adición de Mg (Ac) 2 (60 mM), tampón Tris-Mes, pH 7,6 (50 mM) y [32P] ATP (20 pM, 5 µCi / ensayo). La reacción se lleva a cabo a 4 ℃ o 15 y se termina mediante la adición de tampón de muestra de dodecilsulfato de sodio (SDS) (glicerol al 10%, Tris 50 mM, pH 6,8, β-mercaptoetanol al 5% y SDS al 3%). Las muestras se procesan en un gel de poliacrilamida SDS al 8% (SDS-PAGE) (preparado a partir de acrilamida al 30% y bis- (acrilamida) al 0,8% y contenía Tris 0,375 M, pH 8,8, SDS al 0,1%, TEMED al 0,05% y 0,46% persulfato de amonio). El gel se seca y la autorradiografía se realiza con película de rayos X Agfa Curix RP2. Las bandas radiactivas relevantes se cortan y cuentan en el modo Cerenkov. La fase rápida de autofosforilación continuó durante otros 10 min. El grado de fosforilación completado en los primeros 10 sa 15 ℃ comprende 1/3 de la señal de autofosforilación total y probablemente refleja la fosforilación del primer sitio en el receptor. Por tanto, el intervalo de 10 s se elige para su uso en experimentos de autofosforilación posteriores. \ n Método Las células GH3 se siembran en placas a 5 × 104 células / pocillo en un medio que contiene FCS al 2% con carbón y varias concentraciones de grelina, grelina desoctanoilada y PMA o EGF durante 72 horas con la adición de 2 μCi / pocillo de timidina [3H] durante otras 6 horas. Se realiza un transcurso de tiempo de 24 horas, 48 ​​horas y 72 horas para la estimulación con grelina y se seleccionan 72 horas para experimentos adicionales. También se realizan estudios para investigar el efecto de la proliferación inducida por grelina de rata o desoctanoil grelina y el efecto de U0126, GF109203X, AG 18, wortmanina y H-89 sobre la estimulación de MAPK inducida por grelina. Se añade AG 18 a 10 µM 30 min antes de cada tratamiento. Las células se recogen antes del recuento en presencia de líquido de centelleo usando un contador Microbeta 1450. Los experimentos se repiten al menos tres veces.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de EGFR