(R) -Nepicastat HCl 195881-94-8

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 331.81 (R) -Nepicastat HCl, el enantiómero R de Nepicastat HCl, es un inhibidor potente y selectivo con IC50 de 25,1 nM y 18,3 nM para la dopamina bovina y humana -β-hidroxilasa, con afinidad insignificante por otras doce enzimas y trece receptores de neurotransmisores. \ n \ n Actividad biológica (R) -Nepicastat produce una inhibición dependiente de la concentración de la actividad de la dopamina-β-hidroxilasa bovina y humana in vitro. (R) -Nepicastat (30 mg / kg, po) reduce el contenido de noradrenalina, el contenido de dopamina y la proporción de dopamina / noradrenalina en la arteria mesentérica y el ventrículo izquierdo de ratas espontáneamente hipertensas (SHR). \ n Estudios in vitro La actividad de la dopamina-beta-hidroxilasa bovina y humana se analiza midiendo la conversión de tiramina en octopamina. La dopamina-beta-hidroxilasa humana se purifica del medio de cultivo de la línea celular de neuroblastoma SK-N-SH. El ensayo se realiza a pH 5,2 y 32ºC en un medio que contiene acetato de sodio 0,125 M, fumarato 10 mM, CuSO4 0,5 ± 2 µM, catalasa 0,1 mg / ml, tiramina 0,1 mM y ascorbato 4 mM. En un ensayo típico, se añaden 0,5 ± 1 mu de enzima a la mezcla de reacción y, posteriormente, se añade una mezcla de sustrato que contiene catalasa, tiramina y ascorbato para iniciar la reacción (volumen final de 0,2 ml). Las muestras se incuban con o sin la concentración apropiada de nepicastat (RS-25560-197, enantiómero S) o RS-25560-198 (enantiómero R) a 37 ° C durante 30-40 minutos. La reacción se apaga con la solución de parada que contiene EDTA 25 mM y 3-hidroxitiramina 240 µM (patrón interno). Las muestras se analizan en busca de octopamina mediante cromatografía líquida de alta presión en fase inversa (hplc) con detección ultravioleta (uv) a 280 nM. El ciclo de HPLC se realiza a un caudal de 1 mL / min con una columna LiChroCART 125-4 RP-18 y elución isocrática con ácido acético 10 mM, ácido 1-heptano sulfónico 10 mM, fosfato de tetrabutil amonio 12 mM y 10% metanol. El% de actividad restante se calcula en base a los controles (sin RS 25560), se corrige con estándares internos y se ajusta a una curva de concentración-respuesta de cuatro parámetros no lineal. La actividad de nepicastat en doce enzimas y receptores seleccionados se determina mediante el uso de ensayos establecidos. Los datos de unión se analizan mediante ajuste iterativo de curvas a una ecuación logística de cuatro parámetros. Los valores de Ki se calculan a partir de los valores de IC50 mediante la ecuación de Cheng-Pruso €. La actividad inhibidora de la enzima se expresa como CI50 (concentración requerida para producir un 50% de inhibición de la actividad enzimática).

Grupos de Producto : Metabolismo > Inhibidor de hidroxilasa