.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 548.63 ICG-001 antagoniza la transcripción mediada por Wnt / β-catenina / TCF y se une específicamente a la proteína de unión a elementos (CBP) con IC50 de 3 μM, pero no lo es el coactivador transcripcional relacionado p300. \ n Actividad biológica ICG-001 no tiene ningún efecto sobre la construcción informadora relacionada, FOPFLASH, que contiene sitios TCF mutados. Después del tratamiento con 25 μM de ICG-001 durante 8 horas, la célula SW480 reduce los niveles en estado estable de Survivina y ARN y proteína Ciclina D1, los cuales pueden ser regulados positivamente por la β-catenina. ICG-001 induce selectivamente la apoptosis en células transformadas pero no en células de colon normales, reduce el crecimiento in vitro de células de carcinoma de colon. ICG-001, puede rescatar fenotípicamente la diferenciación neuronal inducida por el factor de crecimiento nervioso normal (NGF) y el crecimiento de neuritas en las células mutantes de presenilina-1, enfatizando la importancia de la vía de señalización TCF / β-catenina en el crecimiento de neuritas y la diferenciación neuronal. Un estudio reciente demuestra que 5μM ICG-001 inhibe la EMT inducida por leptina, la invasión y la formación de tumoraciones en las células MCF7. La administración de un análogo soluble en agua de ICG-001 durante 9 semanas reduce la formación de pólipos en el colon y el intestino delgado en un 42% con la misma eficacia que el agente antiinflamatorio no esteroideo Sulindac, que ha demostrado su eficacia en este modelo. No se detecta toxicidad manifiesta durante el transcurso del tratamiento. En el modelo de regresión tumoral de xenoinjerto de ratón desnudo SW620, 150 mg / kg, iv de análogo demuestra una reducción espectacular en el volumen del tumor durante el curso de tratamiento de 19 días, sin mortalidad ni pérdida de peso. ICG-001 (5 mg / kg por día) inhibe significativamente la señalización de beta-catenina y atenúa la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina en ratones, al mismo tiempo que preserva el epitelio. Protocolo (solo como referencia) Ensayo de quinasa: [1]
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DUAL-Luciferase Reporter Assay
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The Dual-Luciferase Reporter (DLR) Assay System provides an efficient means of performing dual reporter assays. In the DLRTM Assay, the activities of firefly (Photinus pyralis) and Renilla (Renilla reniformis, also known as sea pansy) luciferases are measured sequentially from a single sample. The firefly luciferase reporter is measured first by adding Luciferase Assay Reagent II (LAR II) to generate a [glow-type" luminescent signal. After quantifying the firefly luminescence, this reaction is quenched, and the Renilla luciferase reaction is initiated by simultaneously adding Stop & Glo® Reagent to the same tube. The Stop & Glo® Reagent also produces a [glow-type" signal from the Renilla luciferase, which decays slowly over the course of the measurement. In the DLRTM Assay System, both reporters yield linear assays with subattomole (TM Assay provides rapid quantitation of both reporters either in transfected cells or in cell-free transcription/translation reactions.
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Ensayo celular: [1]
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Cell lines
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Human colon carcinoma cell lines SW480, SW620, and HCT116, normal colonic epithelial cell line CCD-841Co
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Concentrations
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~25 μM
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Incubation Time
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24 hours
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Method
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1. Prior to starting the assay, prepare the Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent, and mix thoroughly.
2. For best results, empirical determination of the optimal cell number, apoptosis induction treatment and incubation period for the cell culture system may be necessary.
3. Use identical cell numbers and volumes for the assay and the negative control samples.
4. Do not mix Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent and samples by manual pipetting. Mixing in this manner is unnecessary and may create bubbles that interfere with fluorescence readings or cross-contaminate the samples. Gentle mixing may be performed using a plate shaker.
5. Total incubation time for the assay depends upon the amount of
caspase- 3/7 present in the sample.
6. The Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent is formulated to mediate cellular lysis and support optimal caspase-3/7 activity. In rare instances, the reagent does not affect complete lysis of cultured cells. In such cases, lysis is enhanced by a freeze-thaw cycle. For best results, freeze at -70 °C, then thaw at room temperature. After equilibration, mix to homogeneity and incubate until measurable fluorescence is achieved
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Estudio con animales: [1]
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Animal Models
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Seven-week-old male C57BL/6J-Apc Min/+
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Formulation
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Water-soluble analog of ICG-001 is used.
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Dosages
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300 mg/kg
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Administration
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Water-soluble analog of ICG-001 is treated orally for 9 weeks everyday.
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Conversión de diferentes modelos de animales basados en BSA (valor basado en datos del Borrador de Directrices de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por ejemplo, para modificar la dosis de resveratrol utilizada para un ratón (22,4 mg / kg) a una dosis basada en el BSA para una rata, multiplique 22,4 mg / kg por el factor Km para un ratón y luego divida por el factor Km para una rata. Este cálculo da como resultado una dosis equivalente para ratas de resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Información química
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Molecular Weight (MW)
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548.63
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Formula
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C33H32N4O4
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CAS No.
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780757-88-2
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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100 mg/mL
(182.27 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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35 mg/mL
(63.79 mM)
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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(6S,9aS)-6-(4-hydroxybenzyl)-N-benzyl-8-(naphthalen-1-ylmethyl)-4,7-dioxo-hexahydro-2H-pyrazino[1,2-a]pyrimidine-1(6H)-carboxamide
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Calculadora de molaridad Calculadora de dilución Calculadora de peso molecular
Grupos de Producto : Señalización citoesquelética > Inhibidor de Wnt / beta-catenina
