SMI-4a 438190-29-5

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 273.23 SMI-4a es un potente inhibidor de Pim1 con IC50 de 17 nM, modestamente potente para Pim-2, no inhibe significativamente ninguna otra serina / treonina o tirosina -quinasas. \ n Actividad biológica SMI-4a es un inhibidor competitivo de ATP de Pim1 con IC50 de 17 nM. SMI-4a muestra una alta selectividad por Pim1 frente a un panel de quinasas. SMI-4a inhibe la fosforilación in vitro por Pim-1 del sustrato conocido, el represor de traducción 4E-BP1. SMI-4a (5μM) inhibe el crecimiento de células pancreáticas y leucémicas. SMI-4a reduce la fosforilación del objetivo Pim Bad en células prostáticas y hematopoyéticas. SMI-4a provoca la detención del ciclo celular e invierte la actividad antiapoptótica de Pim-1. SMI-4a aumenta la cantidad de p27Kip1 en el núcleo. El tratamiento con SMI-4a de pre-T-LBL inhibe la vía mTOR. SMI-4a reduce la expresión de la proteína MYC en pre-T-LBL. El tratamiento con SMI-4a induce una regulación positiva de la vía MAPK. El tratamiento con SMI-4a (60 mg / kg) dos veces al día reduce significativamente el tamaño del tumor y es bien tolerado. Los tumores recolectados 1 hora después de la alimentación por sonda oral final de SMI-4a demuestran una disminución de la fosforilación de p70 S6K en comparación con los tumores de ratones tratados con vehículo, mientras que en comparación la expresión total de p70 S6K no cambia. \ n Los valores de IC50 del ensayo de actividad quinasa para los inhibidores de Pim se miden mediante un ensayo de quinasa acoplada como se describió anteriormente con los siguientes cambios: los ensayos se llevan a cabo en MOPS 20 mM que contienen NaCl 100 mM, MgCl2 10 mM, fosfoenolpiruvato 2,5 mM, NADH 0,2 mM, 30 μg / ml de piruvato quinasa, 10 μg / ml de lactato deshidrogenasa, DTT 2 mM y Pim-1 25 nM con péptido 100 μM. La actividad se mide controlando la oxidación de NADH como la disminución a 340 nm en un lector de microplacas VersaMax a 25 ℃. Las reacciones se inician mediante la adición de ATP (100 µM) y los inhibidores (DMSO final al 1%) se añaden justo antes de la adición de ATP. Los valores de CI50 se determinan usando regresión no lineal con el programa GraphPad Prism. Este ensayo determina la actividad de la quinasa midiendo la cantidad de ADP producida, que se acopla a la oxidación de NADH por la lactato deshidrogenasa y la piruvato quinasa. La capacidad de la quinasa Pim-1 para fosforilar los sustratos proteicos de longitud completa 4E-BP1 y p27Kip1 se determina de la siguiente manera: se agrega Pim-1 purificado (1 ng) junto con 4E-BP1 (2 μg) o p27Kip1 (2 μg) y el inhibidor de Pim. en tampón de ensayo [MOPS 20 mM (pH 7) que contiene NaCl 100 mM, MgCl2 10 mM y DTT 2 mM]. Los ensayos se inician mediante la adición de ATP (100 µM) y [γ-32P] ATP (10 µCi). Se deja que las reacciones prosigan durante 15 min a 30ºC y luego se separan mediante SDS-PAGE. Los sustratos fosforilados con 32P se visualizan mediante autorradiografía y se cuantifican mediante densitometría.

Grupos de Producto : Epigenética > Inhibidor de Pim