Ki8751 228559-41-9

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 469,41 Ki8751 es un inhibidor potente y selectivo de VEGFR2 con IC50 de 0,9 nM,> 40 veces más selectivo para VEGFR2 que c-Kit, PDGFRα y FGFR-2, poco actividad frente a EGFR, HGFR e InsR. \ n Actividad biológica Ki8751 inhibe potente y selectivamente VEGFR2 con IC50 de 0,9 nM. Ki8751 también inhibe PDGFRα, c-Kit y FGFR-2, con valores de CI50 mucho más altos (40 nM – 170 nM). Excepto por estas varias quinasas, Ki8751 no altera otras quinasas, incluidas HGFR, EGFR e InsulinR, incluso a 10 μM. En las células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC), Ki8751 (1 nM-100 nM) reduce eficazmente la proliferación celular estimulada por VEGF y la permeabilidad de la vasculatura. En células de cáncer colorrectal metastásico (CRC) MIP, RKO, SW620 y SW480, pero no en HCT116, Ki8751 (10 nM) aumenta la senescencia celular. En ratones desnudos que portan xenoinjertos de tumores humanos de células GL07, St-4, LC6, DLD-1 y A375, Ki8751 (20 mg / kg) inhibe el crecimiento tumoral. En modelos de xenoinjerto de rata desnuda de células LC-6, Ki8751 (5 mg / kg) inhibe completamente el crecimiento tumoral sin afectar el peso corporal. \ n Ensayos de quinasa celular Células NIH3T3 preparadas mediante transfección de KDR humano. Las células se cultivan en una placa de 96 pocillos revestida con colágeno de tipo I en una cantidad de 1,5 x 104 por pocillo. A continuación, el medio se reemplaza por un medio DMEM que contiene FCS al 0,1%. Se añade Ki8751 diluido en DMSO a cada pocillo y se cultiva. Se añade rhVEGF hasta una concentración final de 100 ng / ml y se lleva a cabo la estimulación de las células a 37ºC. Las células se lavan con PBS (pH 7,4), 50 μL de un tampón de solubilización (HEPES 20 mM (pH 7,4), NaCl 150 mM, Triton X-100 al 0,2%, glicerol al 10%, Na3VO4 5 mM, tetraacetato de etilendiamina disódico 5 mM , y luego 2 mM de Na4P2O7) y se prepara un extracto celular. Por separado, se añade PBS (50 μl, pH 7,4) que contiene 5 μg / ml de anticuerpo antifosfotirosina (PY20) a una microplaca para ELISA. Después de lavar la placa, se añaden 300 μL de una solución de bloqueo. El extracto celular se transfiere a la placa. Se añaden un anticuerpo anti-VEGFR2 y un anticuerpo Ig anti-conejo marcado con peroxidasa. A continuación, se añade un sustrato cromofórico para peroxidasa y se mide la absorbancia a 450 nm con un lector de microplacas. La actividad de fosforilación de VEGFR2 para cada pocillo se determina asumiendo que la absorbancia con la adición de VEGF y sin la adición de la muestra de prueba es 100% de actividad de fosforilación de VEGFR2 y VEGF es 0% de actividad de fosforilación de VEGFR2. La concentración de inhibición (%) de la fosforilación de VEGFR2 se determina para cada caso y se calcula el valor de CI50. Método Para evaluar la inhibición de la proliferación de HUVEC estimulada por VEGF por Ki8751, las HUVEC se cultivan en placas a una densidad de 4000 células / 200 μl / pocillo en placas de 96 pocillos prerrevestidas con colágeno tipo I. Después de 24 horas, las células se incuban durante 1 hora con Ki8751 y luego se estimulan con 20 ng / ml de rhVEGF. Los cultivos se incuban a 37ºC durante 72 horas, luego se pulsan con 1 µCi / pocillo de [3H] timidina y se vuelven a incubar durante 14 horas. Las células se analizan para determinar la incorporación de tritio usando un contador beta.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de VEGFR