Vatalanib (PTK787) 2HCl 212141-51-0

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 419.73 Vatalanib (PTK787) es un inhibidor de VEGFR2 / KDR con IC50 de 37 nM, menos potente contra VEGFR1 / Flt-1, 18 veces contra VEGFR3 / Flt- 4. Fase 3. \ n Actividad biológica Vatalanib también inhibe Flk, c-Kit y PDGFRβ con IC50 de 270 nM, 730 nM y 580 nM, respectivamente. Además, vatalanib muestra el efecto antiproliferación al inhibir la incorporación de timidina inducida por VEGF en HUVEC con una CI50 de 7,1 nM, y suprime de manera dependiente de la dosis la supervivencia y la migración de células endoteliales inducidas por VEGF en el mismo rango de dosis sin efecto citotóxico o antiproliferativo en células que no expresan receptores de VEGF. Un estudio reciente muestra que vatalanib inhibe significativamente el crecimiento de células de carcinoma hepatocelular y mejora la apoptosis inducida por IFN / 5-FU al aumentar los niveles de proteínas de Bax y reducir Bcl-xL y Bcl-2. Vatalanib induce la inhibición dependiente de la dosis de la respuesta angiogénica a VEGF y PDGF tanto en un modelo de implante de factor de crecimiento como en un modelo de angiogénesis inducida por células tumorales después de una dosis oral una vez al día (25-100 mg / kg). En el mismo intervalo de dosis, vatalanib también inhibe el crecimiento y la metástasis de varios carcinomas humanos en ratones desnudos sin un efecto significativo sobre las células sanguíneas circulantes o los leucocitos de la médula ósea. \ n Ensayos de tirosina quinasa del receptor de VEGF Los ensayos de quinasa in vitro se realizan en placas de 96 pocillos como un ensayo de unión de filtro, utilizando los dominios de quinasa fusionados con GST recombinante expresados ​​en baculovirus y purificados sobre glutatión-sefarosa. Se utiliza γ- [33P] ATP como donante de fosfato, y como aceptor se utiliza el péptido poli (Glu: Tyr 4: 1). Las proteínas de fusión GST recombinantes se diluyen en Tris · HCl 20 mM (pH 7,5) que contiene 1 a 3 mM de MnCl2, 3 a 10 mM de MgCl2, 0,25 mg / ml de polietilenglicol 20000 y 1 mM de DTT, según su actividad específica. Cada quinasa fusionada con GST se incuba en condiciones de tampón optimizadas [tampón Tris-HCl 20 mM (pH 7,5), MnCl2 1-3 mM, MgCl2 3-10 mM, poli (Glu: Tyr 4: 1) 3-8 μg / mL ), 0,25 mg / ml de polietilenglicol 20000, 8 μM de ATP, 10 μM de vanadato de sodio, 1 mM de DTT y 0,2 μCi [γ-33P] ATP en un volumen total de 30 μL en presencia o ausencia de una sustancia problema durante 10 minutos a temperatura ambiente. La reacción se detiene añadiendo 10 µl de EDTA 250 mM. Usando un sistema de filtro de 96 pocillos, la mitad del volumen (20 μL) se transfiere a una membrana de difluoruro de polivinilideno Immobilon. A continuación, la membrana se lava extensamente en H3PO4 al 0,5% y luego se sumerge en etanol. Después de secar, se añade el cóctel Microscint y se realiza el recuento de centelleo. Las CI50 para PTK787 / ZK 222584 o SU5416 en estos, así como en todos los ensayos descritos a continuación, se calculan mediante análisis de regresión lineal del porcentaje de inhibición. \ n Método Como prueba de la capacidad de PTK787 / ZK 222584 para inhibir una respuesta funcional a VEGF, se utiliza un ensayo de proliferación de células endoteliales, basado en la incorporación de BrdUrd. Las HUVEC subconfluentes se siembran en placas de 96 pocillos recubiertas con gelatina al 1,5% y luego se incuban a 37 ° C y CO2 al 5% en medio de crecimiento. Después de 24 horas, el medio de crecimiento se reemplaza por medio basal que contiene 1,5% de FCS y una concentración constante de VEGF (50 ng / ml), bFGF (0,5 ng / ml) o FCS (5%), en presencia o ausencia de PTK787. / ZK 222584. Como control, también se incluyen los pozos sin factor de crecimiento. Después de 24 horas de incubación, se agrega la solución de marcado de BrdUrd y las células se incuban durante 24 horas más antes de la fijación, el bloqueo y la adición del anticuerpo anti-BrdUrd marcado con peroxidasa. A continuación, el anticuerpo unido se detecta usando sustrato de 3,3'5,5'-tetrametilbencidina, lo que da como resultado un producto de reacción coloreado que se cuantifica espectrofotométricamente a 450 nm.

Grupos de Producto : Proteína tirosina quinasa > Inhibidor de VEGFR