AGI-6780 1432660-47-3

.cp_wz tabla {borde superior: 1px sólido #ccc; borde izquierdo: 1px sólido #ccc; } .cp_wz table td {borde derecho: 1px sólido #ccc; borde inferior: 1px sólido #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; relleno: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 481.51 AGI-6780 es un inhibidor potente y selectivo del mutante IDH2 R140Q con IC50 de 23 nM. \ n \ n La actividad biológica AGI-6780 reduce de forma potente (R) - Niveles de 2-hidroxiglutarato (2HG) en líneas celulares que sobreexpresan ectópicamente IDH2 / R140Q con EC50 de 20 nM, con excelente selectividad frente a otras deshidrogenasas. AGI-6780 revierte el bloqueo de diferenciación inducido por IDH2 / R140Q en células TF-1 e induce la diferenciación de blastos en muestras de pacientes con AML IDH2 / R140Q humana primaria. Ensayo enzimático de inhibidores de IDH El compuesto se prepara como una solución madre 10 mM en DMSO y se diluye a una concentración final 50X en DMSO, para obtener una mezcla de reacción de 50 µL. La actividad de la enzima IDH que convierte el alfa-cetoglutarato en 2-hidroxiglutarato se mide usando un ensayo de depleción de NADPH. En el ensayo, el cofactor restante se mide al final de la reacción con la adición de un exceso catalítico de diaforasa y resazurina, para generar una señal fluorescente en proporción a la cantidad de NADPH restante. La actividad de la enzima IDH en la dirección de conversión de isocitrato a alfa-cetoglutarato se mide mediante el acoplamiento directo de la producción de NADPH a la conversión de resazurina en resorufina por diaforasa. En ambos casos, la resorufina se mide fluorométricamente en Ex544 Em 590. Para el ensayo del homodímero IDH2 / R140Q y el heterodímero IDH2-R140Q / WT, la proteína se diluye a 0,31 μg / ml en 40 μl de tampón de ensayo (NaCl 150 mM, 50 mM 3 fosfato de potasio pH 7,5, MgCl2 10 mM, glicerol al 10%, BSA al 0,05%, β-mercapoetanol 2 mM) que contiene NADPH 5 µM. Se agrega 1 μl de dilución de compuesto 50X y la mezcla se incuba durante 16 horas a 25 ° C. La reacción enzimática se inicia con la adición de 10 µl de tampón de ensayo que contiene alfa-cetoglutarato 8 mM y se incuba a 25 ° C durante 60 minutos. La reacción se detiene con la adición de tampón de detección (tampón de ensayo 1X que contiene 36 μg / ml de diaforasa y 18 μM de resazurina), se incuba durante cinco minutos a temperatura ambiente y se lee en un lector de placas SpectraMax 384.

Grupos de Producto : Metabolismo > Inhibidor de la deshidrogenasa